[发明专利]一种植物叶际表面微生物宏基因组检测方法有效
申请号: | 202110808262.0 | 申请日: | 2021-07-16 |
公开(公告)号: | CN113528614B | 公开(公告)日: | 2023-05-23 |
发明(设计)人: | 王汐月;孙晓玥;吴森;邢志凯;王绪敏;曲江勇;王丽君;刘秀梅 | 申请(专利权)人: | 烟台大学 |
主分类号: | C12Q1/6806 | 分类号: | C12Q1/6806;C12N15/11 |
代理公司: | 北京精金石知识产权代理有限公司 11470 | 代理人: | 朱宝莉 |
地址: | 264003 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 植物 表面 微生物 宏基 检测 方法 | ||
1.一组用于植物叶际表面微生物宏基因组检测的引物组合物,其特征在于,所述的引物包括正向引物和反向引物;所述的正向引物包括SEQ ID NO.1-5所示的引物;所述的反向引物包括SEQ ID NO.6-10所示的引物。
2.一种植物叶际表面微生物宏基因组检测方法,其特征在于,所述的植物叶际表面微生物宏基因组检测方法中包括使用权利要求1所述的引物进行PCR扩增以进行文库富集。
3.根据权利要求2所述的植物叶际表面微生物宏基因组检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)总DNA提取;
(2)使用权利要求1所述的引物进行PCR文库富集;
(3)电泳检测PCR文库富集产物;
(4)PCR文库富集产物纯化;
(5)文库浓度检测合格后上机测序。
4.根据权利要求3所述的植物叶际表面微生物宏基因组检测方法,其特征在于,所述的步骤(1)中总DNA提取中使用提取液完成,所述的提取液中包括:25 mM EDTA、120 mM Tris-HCl、2.0M NaCl、2%CTAB、1.5%SDS、1% β-巯基乙醇;所述的Tris-HCl的pH为7.8。
5.根据权利要求3所述的植物叶际表面微生物宏基因组检测方法,其特征在于,所述的步骤(2)的扩增体系中包括:DNA聚合酶、dNTP。
6.权利要求1所述的引物在制备用于植物叶际表面微生物宏基因组检测的试剂和/或试剂盒中的应用。
7.一种用于植物叶际表面微生物宏基因组检测试剂盒,其特征在于,所述的植物叶际表面微生物宏基因组检测试剂盒中包括权利要求1所述的引物。
8.根据权利要求7所述的试剂盒,其特征在于,还包括权利要求2-5任一项所述的植物叶际表面微生物宏基因组检测方法中使用的试剂。
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