[发明专利]用于鉴定陇油杂2号的SSR标记组合及指纹图谱建立与应用在审
申请号: | 202110795246.2 | 申请日: | 2021-07-14 |
公开(公告)号: | CN113667768A | 公开(公告)日: | 2021-11-19 |
发明(设计)人: | 王毅;董云;靳丰蔚;刘婷婷 | 申请(专利权)人: | 甘肃省农业科学院作物研究所 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11 |
代理公司: | 西安汇恩知识产权代理事务所(普通合伙) 61244 | 代理人: | 张伟花 |
地址: | 730070 甘*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 鉴定 陇油杂 ssr 标记 组合 指纹 图谱 建立 应用 | ||
1.一种用于鉴定甘蓝型春油菜品种陇油杂2号的SSR标记组合,其特征在于,所述SSR标记组合包括引物对A和引物对B;所述引物对A的正向引物为CB10299F,反向引物为CB10299R;所述引物对B的正向引物为CB10028F,反向引物为CB10028R;
所述CB10299F具有序列表SEQ.ID.No.1的核苷酸序列;
所述CB10299R具有序列表SEQ.ID.No.2的核苷酸序列;
所述CB10028F具有序列表SEQ.ID.No.3的核苷酸序列;
所述CB10028R具有序列表SEQ.ID.No.4的核苷酸序列。
2.一种用权利要求1所述的用于鉴定甘蓝型春油菜品种陇油杂2号的SSR标记组合构建甘蓝型春油菜品种陇油杂2号的DNA指纹图谱的方法,其特征在于,该方法为:
S1、提取待鉴定的甘蓝型春油菜品种陇油杂2号种子发芽后3天的幼苗的基因组DNA;
S2、以S1中得到的基因组DNA为模板,分别用引物对A和引物对B分别对所述基因组DNA进行PCR扩增得到PCR扩增产物,分别命名为PCR扩增产物A和PCR扩增产物B;
PCR扩增的反应体系为:基因组DNA 1.0μL、含有25mM MgCl2的10×PCR缓冲液2.0μL、10μM的正向引物0.5μL、10μM的反向引物0.5μL、dNTPs 1.0μL,TaqNDA聚合酶0.1μL,ddH2O补足至10μL;
PCR扩增的反应程序为:94℃预变性2min;94℃变性45s,65℃退火30s,72℃延伸45s、每个循环延伸温度降低1℃,进行10次循环;94℃变性45s,55℃退火30s,72℃延伸45s,进行25次循环;72℃终延伸5min;4℃保存;
S3、将S2中得到的PCR扩增产物A和PCR扩增产物B分别进行聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,建立DNA指纹图谱。
3.一种如权利要求1所述的用于鉴定甘蓝型春油菜品种陇油杂2号的SSR标记组合的应用,其特征在于,所述SSR标记组合用于鉴定甘蓝型春油菜品种陇油杂2号的真伪。
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