[发明专利]一种解钾微生物菌剂及其制备和使用方法在审
申请号: | 202110697075.X | 申请日: | 2021-06-23 |
公开(公告)号: | CN113373090A | 公开(公告)日: | 2021-09-10 |
发明(设计)人: | 尹华群;孟德龙;周志成;刘勇军;黎娟 | 申请(专利权)人: | 中南大学;中国烟草中南农业试验站;湖南农业大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C09K17/14;A01B79/00;C12R1/145;C12R1/38;C12R1/225;C12R1/41;C12R1/01;C09K101/00 |
代理公司: | 长沙和雅知识产权代理事务所(普通合伙) 43238 | 代理人: | 林传贵 |
地址: | 410083 湖南*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 微生物 及其 制备 使用方法 | ||
1.一种解钾微生物菌剂,其特征在于,所述解钾微生物菌剂包括以数量百分比计的如下成分:梭菌38-51%、假单胞菌5-36%、芽孢乳杆菌4-31%、根瘤菌5.5-6.5%、假黄色单胞菌3.5-4.0%、伯克氏菌1.3-1.5%和产气杆菌0.5-1.5%。
2.根据权利要求1所述的一种解钾微生物菌剂,其特征在于,所述菌剂包括以数量百分比计的如下成分:梭菌44%、假单胞菌26%、芽孢乳杆菌18%、根瘤菌6%、假黄色单胞菌3.7%、伯克氏菌1.4%和产气杆菌0.9%。
3.根据权利要求1或2所述的一种解钾微生物菌剂,其特征在于,所述梭菌的保藏号为CCTCC AB 209026,所述假单胞菌的保藏号为CGMCC No:10779,所述芽孢乳杆菌的保藏号为CGMCC No:3846,所述根瘤菌的保藏号为CCTCC AB 209029,所述假黄色单胞菌的保藏号为ATCC No:700993,所述伯克氏菌的保藏号为CCTCC AB 209362,所述产气杆菌的保藏号为CCTCC AB 200052。
4.一种如权利要求1或2所述的解钾微生物菌剂的制备方法,其特征在于,所述制备方法为:菌株经固体斜面活化后,分别接种于液体培养基中进行扩大培养48-72h,然后分别加入发酵培养基,以葡萄糖作为碳源,牛肉膏作氮源,以氯化钙为无机盐,调节培养基pH值,在30℃,170r/min条件下培养36-60h,按照所述数量百分比将各菌株的发酵液混合即得到所述解钾微生物菌剂。
5.根据权利要求4所述的一种解钾微生物菌剂的制备方法,其特征在于,
所述梭菌的液体培养基的配方为:胰蛋白胨20g/L,牛肉浸膏10g/L,酵母膏6g/L,葡萄糖4g/L,磷酸氢二钾2g/L,磷酸二氢钾1g/L,硫酸镁0.4g/L,氯化钙0.2g/L,硫酸亚铁0.1g/L,半胱氨酸盐酸盐0.5g/L,调整pH至7.2-7.4;
所述假单胞菌的液体培养基的配方为:氯化铵1g/L,磷酸氢二钾0.5g/L,氯化镁0.2g/L,氯化钠2g/L,酵母膏0.1g/L,碳酸氢钠5g/L,无水乙醇2g/L,调整pH至7.0;
所述芽孢乳杆菌的液体培养基的配方为:葡萄糖20g/L,酵母膏10g/L,蛋白胨10g/L,乙酸钠10g/L,盐溶液5ml/L,调整pH至6.8,盐溶液配方:MgSO4·7H2O 40.0g/L,MnSO4·4H2O2.0g/L,FeSO4·7H2O 2.0g/L,NaCl 2.0g/L;
所述根瘤菌的液体培养基的配方为:蛋白胨10g/L,酵母粉5g/L,氯化钠10g/L,调整pH至7.0;
所述假黄色单胞菌的液体培养基的配方为:蛋白胨10g/L,酵母粉5g/L,氯化钠10g/L,调整pH至7.0;
所述伯克氏菌的液体培养基的配方为:甘露醇10g/L;硫酸铵2g/L;蛋白胨2g/L;磷酸氢二钾0.5g/L,硫酸镁0.5g/L,氯化钠0.1g/L;硫酸亚铁0.05g/L;硫酸锰0.05g/L,调整pH值至7.0;
所述产气杆菌的液体培养基的配方为:胰酪蛋白胨15.0g/L,大豆蛋白胨5.0g/L,酵母粉5.0g/L,氯化钠5.0g/L,L-半胱氨酸盐酸盐0.4g/L,调整pH值至7.0。
6.根据权利要求4所述的一种解钾微生物菌剂的制备方法,其特征在于,所述发酵培养基中包括葡萄糖15-25g/L,牛肉膏3.0-5.0g/L,氯化钙1.0-6.0g/L,调节培养基pH值至6.0-7.0。
7.一种如权利要求1所述的解钾微生物菌剂的使用方法,其特征在于,所述使用方法为:在作物生长的返苗期和旺长期分别施加一次解钾菌剂,用无菌水将解钾菌剂中的菌体浓度调整至1×108cfu/ml后使用,每次使用量为1L/亩。
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