[发明专利]一种高效新型鸡卵白蛋白螯合锌的制备方法

说明书

本发明公开了一种高效新型鸡卵白蛋白螯合锌的制备方法，包括以下步骤：(1)鸡卵白蛋白收集；(2)酶解；(3)灭活：酶解结束后，酶解液进行加热20min酶钝化处理，冷却至室温；(4)离心；(5)螯合；(6)浓缩、干燥。本发明所述的一种高效新型鸡卵白蛋白螯合锌的制备方法，本发明在工艺上提取和螯合过程在低温下进行，可以充分保留鸡卵白蛋白OVA肽螯合锌配位物的功能性；采用本发明方法提取的鸡卵白蛋白OVA肽纯度高，采用优化的螯合条件及特定的螯合质量比可以使鸡卵白蛋白肽和锌离子充分鳌合，最大限度地提高螯合率；本发明原料来源要求不高，能达到既获得鸡卵白蛋白肽生物活性又补充锌的双重功效，同时还能提高鸡蛋蛋清的附加值。

技术领域

本发明涉及生物功能肽螯合金属离子领域，特别涉及一种高效新型鸡卵白蛋白螯合锌的制备方法。

背景技术

鸡卵白蛋白(ovalbumin，OVA)是蛋清的主要蛋白组分，其含量占蛋清蛋白总量的54％，是一种优质蛋白质。OVA的分子质量为44.5kDa，是典型的含磷球形的糖蛋白，其等电点为4.5，由385个氨基酸组成。每1个OVA分子含有1个二硫键和4个巯基，是蛋清蛋白中唯一1个含有游离巯基的蛋白质。

OVA制备蛋清源生物活性肽是指对生物机体的生命活动有益或具有生理作用的肽类化合物，这些肽在母蛋白质序列内不具有生物活性，但通过体内或体外蛋白酶水解或发酵释放出来后则可产生活性,活性肽主要有降脂肽、抗菌肽、免疫肽、抗氧化肽等，具有抗菌活性、免疫调节活性以及抗氧化活性等

锌是动物体内必不可少的一种微量元素。1、锌可调节动物的生长发育，其调节作用主要通过两个方面来完成。一是在调节动物食欲方面：锌主要通过提高动物的采食量，促进动物对采集饲料的转换消化率，提高动物对饲料的利用率，从而有效促进动物的生长。2、锌在动物体的免疫系统发育过程中，锌主要是通过影响机体的免疫器官、免疫细胞和免疫分子来影响整个的免疫系统。动物缺锌会使免疫器官发生萎缩。3、碳酸酐酶的一个重要组成成分就是微量元素锌，在碳酸酐酶中，锌含量约占0.3％。碳酸酐酶是动物机体的代谢产物二氧化碳向体外排泄所必需的一种酶。由此可知，锌在维持动物体内环境酸碱性平衡的过程中，发挥着至关重要的作用。

微量元素锌作为饲料添加剂共经历了三个阶段。第一个阶段为无机锌类添加剂，主要代表有硫酸锌、氯化锌、氧化锌等。这类无机锌在畜牧业生产中应用广泛，但这类无机锌稳定性差，对动物胃肠道有强烈的刺激作用，动物体对这类无机锌的吸收效果不好，消化吸收率很低，在动物的排泄物中有大量的锌元素，对环境污染严重。第二个阶段为比较简单的有酸机锌类添加剂，其主要代表为葡萄糖酸锌、柠檬酸锌、富马酸锌等。此类添加剂虽较第一类产品饲喂效果有一定的提升，稳定性得到改善，但其稳定性依然较差，并且肠道内容物对其影响大，吸收率不理想。而且这两类产品中的锌离子与机体内的其他微量元素之间容易产生拮抗作用，影响其他微量元素的吸收利用。

为了弥补以上两种锌元素添加剂的缺点，世界各国学者不断追求新技术、开发可替代以上两代锌元素添加剂的新产品。在20世纪80年代初，推出了第三类。添加剂，也就是有机锌类添加剂，这类产品主要以氨基酸螯合锌和小肽螯合锌等为代表。与第一类和第二类添加剂相比，有机锌类添加剂，具有很强的抗干扰能力和稳定性，而且还可以很好的被动物体吸收和利用，其消化吸收率极高，生物学效价远远高于无机锌类。有机锌还具有双重作用，在补充微量元素的同时其还可以补充氨基酸或小肽。有研究报道称氨基酸锌还具有杀菌作用，并可有效改善机体的免疫功能

鸡卵白蛋白(ovalbumin)OVA肽螯合锌也是一种比较特殊的第三类饲料添加剂，其主要是通过卵白蛋白肽内的一些化合物与锌离子结合的形式，把游离状态的锌离子转换为结合态的锌离子。相对游离态的锌离子而言，结合态的鸡卵白蛋白肽螯合锌具有稳定、高效、毒性小，在肠道内易吸收的显著优势，而且结合态鸡卵白蛋白肽螯合锌的生产成本也比较低。同时还可以给机体提供补充一定量的氨基酸。因此鸡卵白蛋白肽螯合锌也是一种有较好应用前景的有机锌，同时又可作为较好的蛋白添加剂，故此，我们提出一种高效新型鸡卵白蛋白螯合锌的制备方法来解决此问题。

发明内容