[发明专利]基于金属编码技术的核酸检测方法

说明书

本发明提供了基于金属编码技术的核酸检测方法，具体为：使用金属对磁珠进行编码，将目的基因的探针与所述磁珠偶联，得到金属编码的探针磁珠；提取基因，利用修饰了生物素的引物进行扩增；金属编码的探针磁珠和扩增后的基因共孵育；加入金属标记的亲和素与所述生物素结合，去除多余成分，之后送质谱仪检测；标记所述亲和素的金属和对磁珠编码的金属不同；使用质谱技术获得亲和素中金属离子的含量；利用获得的金属离子含量及映射关系得到基因的信息，所述映射关系是金属离子含量与基因的信息间的对应关系。本发明具有检测准确度高、快速等优点。

技术领域

本发明涉及核酸检测，特别涉及基于金属编码技术的核酸检测方法。

背景技术

随着人类基因组计划(HGP)的完成和数量巨大的遗传信息的获得，人们的兴趣转向了解个体之间基因的差异性以及这种差异如何影响不同个体对疾病的敏感性及对药物的反应性。在公共卫生领域，也需要对引起突发公共卫生事件如不明原因的传染病的病原进行快速筛查，这都需要对DNA样品进行快速、可靠、经济和高通量的检测。

基因检测在遗传性疾病、肿瘤、感染性疾病的诊疗、预后预测、用药指导等多个方面起着举足轻重的作用。目前检测手段众多且各具特色。以PCR为基础的检测手段，诸如ARMS-PCR，荧光定量PCR、数字PCR等，操作简便，快速，数据分析简单，但是由于通量的限制，无法满足上临床对多个基因、多位点检测的需求。

目前的检测方法中以荧光检测为基础的检测方法最为广泛，但是因为各色荧光之间存在光谱重叠，从根本上限制了检测的通量。最近，荧光编码微球技术已经被开发出来，通过制备大量荧光编码的微球来解决这个问题。但是其制备过程复杂，难度较大，并且在使用荧光编码的微球的过程中，进一步的包被会影响荧光信号的检测。因此，人们有兴趣探索非光学的标签和检测方法，希望能够简化标记过程并提供高通量、快速以及精确的测定。

发明内容

为解决上述现有技术方案中的不足，本发明提供了一种基于金属编码技术的核酸检测方法。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

基于金属编码技术的核酸检测方法，所述基于金属编码技术的核酸检测方法为：

使用金属对磁珠进行编码，将目的基因的探针与所述磁珠偶联，得到金属编码的探针磁珠；

提取基因，利用修饰了生物素的引物进行扩增；

金属编码的探针磁珠和扩增后的基因共孵育；

加入金属标记的亲和素与所述生物素结合，去除多余成分，之后送质谱仪检测；标记所述亲和素的金属和对磁珠编码的金属不同；

使用质谱技术获得亲和素中金属离子的含量；

利用获得的金属离子含量及映射关系得到基因的信息，所述映射关系是金属离子含量与基因的信息间的对应关系。

与现有技术相比，本发明具有的有益效果为：

1.过程简单、难度低；

基因提取、探针磁珠的制备以及孵育等都是利用成熟的技术，降低了复杂度及难度；

2.过检测准确度高、分辨率高；

在调试中，精准地同步调节竖直炬管和线圈的空间位置，达到每个工况下的最佳位置，获得最准确的检测数据；

实现炬管在三个维度上微调，三个方向的位置精度和重复精度可以达到0.01mm，实现炬管火焰与锥口达到最佳位置；

本发明的飞行时间质谱分析器可对更宽的离子初始位置分散实现二阶时间聚焦，质量分辨率显著提升；

3.灵敏度高；