[发明专利]基于金属编码技术的核酸检测方法

权利要求书

1.基于金属编码技术的核酸检测方法，所述基于金属编码技术的核酸检测方法为：

使用金属对磁珠进行编码，将目的基因的探针与所述磁珠偶联，得到金属编码的探针磁珠；

提取基因，利用修饰了生物素的引物进行扩增；

金属编码的探针磁珠和扩增后的基因共孵育；

加入金属标记的亲和素与所述生物素结合，去除多余成分，之后送质谱仪检测；标记所述亲和素的金属和对磁珠编码的金属不同；

使用质谱技术获得亲和素中金属离子的含量；

利用获得的金属离子含量及映射关系得到基因的信息，所述映射关系是金属离子含量与基因的信息间的对应关系。

2.根据权利要求1所述的基于金属编码技术的核酸检测方法，其特征在于，使用金属编码磁珠的方式为：

使用不同质量数的金属盐溶液与中间体孵育，形成金属离子螯合物；

金属离子螯合物或若干种不同的金属离子螯合物的组合分别与不同磁珠反应结合；去除过量的金属离子螯合物；

加入化学活化试剂，活化不同磁珠表面基团，加入经修饰后的核酸探针，并孵育，所述核酸探针包括针对单一基因的多位点探针以及多基因检测的探针组合；去除过量的目的基因探针。

3.根据权利要求1所述的基于金属编码技术的核酸检测方法，其特征在于，基因的提取方式为：

使用RNA提取试剂盒提取总RNA，使用逆转录试剂盒对总RNA进行逆转录得到cDNA。

4.根据权利要求1所述的基于金属编码技术的核酸检测方法，其特征在于，所述映射关系的获得方式为：

制备具有梯度浓度的核酸标准品；

使用所述检测方法检测所述核酸标准品，获得金属离子含量，从而得到金属离子含量和核酸浓度间的对应关系。

5.根据权利要求4所述的基于金属编码技术的核酸检测方法，其特征在于，所述核酸标准品为多种，每一梯度浓度的多种核酸标准品的浓度相同。

6.根据权利要求1所述的基于金属编码技术的核酸检测方法，其特征在于，在质谱检测中，离子化的具体方式为：

马达转动，转换模块将马达的转动转换为滑动件的直线移动；

将所述滑动件的直线移动转换为转换件的竖直移动，从而带动与所述转换件连接的承载件沿着多个导向件竖直移动，设置在所述承载件上的承载单元随着所述承载件竖直移动；炬管竖直地设置在所述承载单元上，线圈固定在所述承载单元上，并与所述炬管保持相对静止；

在水平方向上二维调节所述承载单元的位置，所述承载单元设置在二维调节单元上，所述二维调节单元设置在所述承载件上；

样本进入所述炬管内，通过所述线圈激发成等离子体，从而形成离子；

所述离子穿过采样锥后进入质谱分析单元。

7.根据权利要求1所述的基于金属编码技术的核酸检测方法，其特征在于，在质谱检测中，使用飞行时间质量分析器，所述飞行时间质量分析器包括推斥极、无场飞行区和检测器，所述无场飞行区包括第一入射栅网；所述飞行时间质量分析器还包括：

牵引电极，所述牵引电极和所述第一入射栅网间形成第一离子加速区；

第一栅网和第二栅网，所述第一栅网和第二栅网间电势差为零；所述推斥极和第一栅网间，以及第二栅网和牵引电极间形成第二离子加速区；离子依次穿过第一栅网、第二栅网、牵引电极、第一入射栅网和无场飞行区，被所述检测器接收。

8.根据权利要求7所述的基于金属编码技术的核酸检测方法，其特征在于，所述飞行时间质量分析器还包括：

反射区，所述反射区包括第一反射场和第二反射场，所述第一反射场包括第二入射栅网和反射电极，第二反射场包括所述反射电极和反射板；从所述无场飞行区出射的离子被所述反射区反射，之后被所述检测器接收。