[发明专利]一种病毒基因组核酸快速提取试剂盒及其使用方法

说明书

本发明属于试剂盒技术领域，公开了一种病毒基因组核酸快速提取试剂盒及其使用方法，所述病毒基因组核酸快速提取试剂盒由溶液I、溶液II、的溶液III、Eluent溶液、带硅膜柱的制备管、2mL离心管、1.5mL离心管和使用说明书组成。本发明操作方法简单快速，重复性好，无需进行酚氯仿或Trizol抽提；可同时提取任何液体中的微量DNA/RNA；本试剂盒核酸提取的效率高，优于Trizol法，提取过程中核酸损失极少；提取得到的DNA/RNA纯度高，特别适用于后续的分子生物学实验。

技术领域

本发明属于试剂盒技术领域，尤其涉及一种病毒基因组核酸快速提取试剂盒及其使用方法。

背景技术

目前，核酸是一类生物聚合物，是所有已知生命必不可少的组成物质，广泛存在于动植物细胞、微生物体内，分为脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。目前，在分子生物学科的各个研究检测领域都离不开核酸的检测，核酸的提取纯化是分子生物学研究和临床检测的基础。

现有的核酸提取方法主要包括碱裂解法、酚氯仿抽提法、螯合树脂法、离心柱膜吸附法以及磁珠法等。但是，现有的核酸提取方法具有核酸质量不佳、操作步骤繁琐、耗时较长的缺陷。因此，亟需一种新的核酸提取方法。

通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：现有的核酸提取方法具有核酸质量不佳、操作步骤繁琐、耗时较长、且所用试剂具有一定毒性的缺陷。

解决以上问题及缺陷的难度为：目前市场上常用的病毒基因组核酸提取试剂盒分别是针对DNA提取和RNA提取的，很少能同时提取DNA和RNA。经常用于提取病毒基因组核酸的方法能够满足试验要求，但碱裂解法、酚氯仿抽提法和异丙醇沉淀法等方法操作复杂，使用的试剂具有一定的毒性，对操作人员的健康危害大；磁珠法对DNA提取效果好，但价格昂贵，不适用于生产应用。

解决以上问题及缺陷的意义为：本发明联合采用多种核酸提取成分和技术，操作过程中未用到酚、氯仿以及Trizol，可提取微量的核酸，提取方法简单快速，提取过程不需要使用昂贵的设备和试剂，提取的核酸纯度高，特别适用于下游分子生物学研究。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种病毒基因组核酸快速提取试剂盒及其使用方法。

本发明是这样实现的，一种病毒基因组核酸快速提取试剂盒，包含5-15mL的溶液I、10-20mL的溶液II、25-30mL的溶液III、1.5-2mL的Eluent、多支制备管、多支2mL离心管、多支1.5mL离心管和使用说明书。

进一步，所述溶液I包括1-6M异硫氰酸胍，同时包括10-30mM柠檬酸三钠、或者5-25mM十二烷基肌氨酸钠、或者1-10mM二硫苏糖醇、或者0.1-1mM乙二胺四乙酸二钠、或者0.01-1mg/ml的糖原。

进一步，所述溶液II包括40-60％异丙醇和3moL乙酸钠，pH小于等于5。

进一步，所述溶液III包括60-75％乙醇和1-10mM的Tris-HCl。

进一步，所述Tris-HCl的pH为7.5。

进一步，所述Eluent包括1-10mM/L的Tris-HCl，或者同时包括0.1-1mM/L的EDTA。

进一步，所述Tris-HCl的pH为7-9。

本发明的另一目的在于提供一种应用所述的病毒基因组核酸快速提取试剂盒的病毒基因组核酸快速提取试剂盒的使用方法，所述病毒基因组核酸快速提取试剂盒的使用方法包括以下步骤：

步骤一，取待抽提的含有核酸的液体50ul，置于0.6mL或1.5mL离心管中，加入200ul溶液I，上下反转颠倒充分混匀，室温放置5min；