[发明专利]一种病毒基因组核酸快速提取试剂盒及其使用方法有效
申请号: | 202110657003.2 | 申请日: | 2021-06-11 |
公开(公告)号: | CN113215148B | 公开(公告)日: | 2022-08-26 |
发明(设计)人: | 张其威;吴建国;谭秋萍 | 申请(专利权)人: | 广东龙帆生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 北京金智普华知识产权代理有限公司 11401 | 代理人: | 蓝晓玉 |
地址: | 528315 广东省佛山市顺德区*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 病毒 基因组 核酸 快速 提取 试剂盒 及其 使用方法 | ||
1.一种病毒基因组核酸快速提取试剂盒,其特征在于,所述病毒基因组核酸快速提取试剂盒包含5-15mL的溶液I;所述溶液I包括1-4moL异硫氰酸胍、10-25mmoL柠檬酸三钠、10-20mmoL二硫苏糖醇和0.01-0.1%(m/v)糖原;
所述基因组核酸快速提取试剂盒进一步包含:
10-20mL的溶液II、25-30mL的溶液III、1.5-2mL的Eluent、多支制备管、多支2mL离心管、多支1.5mL离心管和使用说明书;
所述溶液II包括40-60%异丙醇和2-4moL乙酸钠,pH小于等于5;
所述溶液III包括60-75%乙醇和1-10mM的Tris-HCl,Tris-HCl的pH为6.5-8.0;
所述Eluent包括1-10mM/L的Tris-HCl和0.1-1mM/L的EDTA;
所述Tris-HCl的pH为7-9;
所述病毒基因组核酸快速提取试剂盒的使用方法包括以下步骤:
步骤一,取待抽提的含有核酸的液体50ul,置于0.6mL或1.5mL离心管中,加入200ul溶液I,上下反转颠倒充分混匀,室温放置1-5min;
步骤二,加入250ul溶液II,上下反转颠倒混合均匀;吸取混合液,转移到DNA制备管,DNA制备管事先置于2ml离心管中,10000-13000×g离心1-3min,弃滤液;
步骤三,将制备管置回2ml离心管,加500μl溶液III,10000-13000×g离心30-60s,弃滤液;
步骤四,将制备管置于2ml离心管中,10000-13000×g离心30-90s;
步骤五,将制备管置于洁净的1.5ml离心管中,在制备膜中央加20-50μlEluent,在制备膜中央加20-50μl Eluent之前,将Eluent加热至50-65℃,室温静置1-3min,10000-13000×g离心1-3min洗脱DNA/RNA。
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