[发明专利]一种合成大麻二酚的表达载体、异源表达方法及应用在审
申请号: | 202110656198.9 | 申请日: | 2021-06-11 |
公开(公告)号: | CN113416748A | 公开(公告)日: | 2021-09-21 |
发明(设计)人: | 曹应龙;虞沂;邹小林 | 申请(专利权)人: | 湖北碳元本草生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;C12N15/54;C12N15/60;C12N15/53;C12N5/10;C12N1/21;A01H5/12;A01H6/82;C12P7/22 |
代理公司: | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人: | 龙凯 |
地址: | 430000 湖北省武汉市东湖新技*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 合成 大麻 表达 载体 方法 应用 | ||
1.一种合成大麻二酚的表达载体,包含表达合成大麻二酚所需的酶,其特征在于,所述酶为AAE1、TKS、OAC、CsPT4和CBDAS。
2.包含权利要求1所述载体的烟草细胞。
3.权利要求2所述烟草细胞在生产大麻二酚中的应用。
4.一种构建合成大麻二酚工程菌的方法,其特征在于,采用组合基因表达盒的方式构建编码基因AAE1、TKS、OAC、CsPT4、CBDAS的重组载体,将重组载体转化至农杆菌中即得。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述重组载体通过pUC19-TKS分别添加编码目的基因OAC、CsPT4、CBDAS得到中间载体,然后连接pC2300S载体,通过同源重组添加基因AAE1获得。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,在构建所述中间载体时,所述编码基因OAC和CsPT4分别添加15-20个简并碱基N。
7.一种通过异源表达生产大麻二酚的方法,其特征在于,将包含权利要求4-6任一项所述工程菌侵染烟草叶片,获得表达产物。
8.根据权利要求7所述生产大麻二酚的方法,其特征在于,通过使用LB培养基培养所述工程菌,重悬后侵染烟草。
9.根据权利要求8所述生产大麻二酚的方法,其特征在于,所述烟草叶片中大麻二酚含量为0.69054mg/mL。
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