[发明专利]一种快速鉴别老年黄斑病变风险的方法及应用在审
申请号: | 202110649632.0 | 申请日: | 2021-07-23 |
公开(公告)号: | CN113293206A | 公开(公告)日: | 2021-08-24 |
发明(设计)人: | 李鹏;齐琳洁;张晓飞;程芳婷;梁亮;李默 | 申请(专利权)人: | 西安医臻生物医药科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6883 | 分类号: | C12Q1/6883;C12Q1/6858;C12N15/11 |
代理公司: | 西安铭泽知识产权代理事务所(普通合伙) 61223 | 代理人: | 崔瑞迎 |
地址: | 710086 陕西省西安市沣*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 快速 鉴别 老年 黄斑 病变 风险 方法 应用 | ||
1.一种快速鉴别老年黄斑病变风险的方法,其特征在于,具体包括如下步骤:
S1,样本DNA提取;
S2,ARMS-qPCR法扩增样本DNA:
以S1中提取的样本DNA为模板,设置野生型引物扩增组,记为A组,设置突变型引物扩增组,记为B组,A组和B组的正向引物均为CFH-F,其核苷酸序列如如SEQ ID NO.1所示;
A组反向引物记为CFH-R(T),其序列如SEQ ID NO.2所示;
B组的反向引物记为CFH-R(C),其序列如SEQ ID NO.3所示;
同时对A、B两组进行荧光定量PCR检测,最后对检测结果进行判读;
所述检测结果进行判读计算方式为:ΔCt=Ct B组-Ct A组,当ΔCt≥7,其患老年黄斑病变风险较低,当ΔCt≤-7,其患老年黄斑病变风险较高。
2.如权利要1所述的一种快速鉴别老年黄斑病变风险的方法,其特征在于,所述检测结果判读过程中根据溶解曲线确定扩增反应效果,溶解曲线只有单峰且出峰位置是目的产物退火温度Tm=90℃(Tm相差范围为±2℃),那么实验结果有效,可对数据进行判读。
3.如权利要求2所述的一种快速鉴别老年黄斑病变风险的方法,其特征在于,所述检测结果判定标准为:当ΔCt≥7,则基因型为野生型,当ΔCt≤-7,则基因型为突变型,当-2≤ΔCt≤2,则基因型为杂合型。
4.如权利要求3所述的一种快速鉴别老年黄斑病变风险的方法,其特征在于,所述野生型即CFH TC位点为TT型,相比较于TC或CC型,其患老年黄斑病变风险较低。
5.如权利要求3所述的一种快速鉴别老年黄斑病变风险的方法,其特征在于,所述突变型即CFH TC位点为CC型,相比较于TT型,其患老年黄斑病变风险较高。
6.如权利要求3所述的一种快速鉴别老年黄斑病变风险的方法,其特征在于,所述杂合型即CFH TC位点为TC型,相比较于TT型,其患老年黄斑病变风险较高。
7.权利要求1所述CFH基因在制备防御老年黄斑病变药物中的用途。
8.权利要求7所述CFH基因的表达产物在制备防御老年黄斑病变药物中的用途。
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