[发明专利]针对C型逆转录病毒的数字PCR检测用引物及检测方法

权利要求书

1.针对C型逆转录病毒的数字PCR检测用引物组，其特征在于，该引物组针对C型逆转录病毒设计，适用于数字PCR检测应用，具体引物设计为：

C-type-F：5’-ccggacccctgagtcacc -3’，

C-type-R：5’-taccagtcgcgagctggag -3’；

C-type-探针：FAM-TGGGTACAGGGAGCTACAGGCGGAA-BHQ1；

利用上述引物组进行PCR扩增时，扩增片段长度为99bp，扩增序列如SEQ ID No.1所示，具体如下：

ccggacccctgagtcaccggactgcatgggtacagggagctacaggcggaaagcagtaccattggactacaaatcggcagctccagctcgcgactggta。

2.基于所述针对C型逆转录病毒的数字PCR检测用引物组的数字PCR扩增检测用试剂盒。

3.所述针对C型逆转录病毒的数字PCR检测用引物组在C型逆转录病毒检测中应用，其特征在于，用于检测CHO细胞中C型逆转录病毒。

4.基于所述针对C型逆转录病毒的数字PCR检测用引物组的C型逆转录病毒的数字PCR检测方法，其特征在于，以C型逆转录病毒的RNA作为为模板，进行数字PCR扩增。

5.如权利要求4所述数字PCR检测方法，其特征在于，数字PCR扩增时，15μl反应体系设计如下：

RNA模板，3μl；

C-type-F，10μM、0.6μl；

C-type-R，10μM、1.2μl；

C-type-探针，10μM、0.36μl；

2x 的RT-PCR Buffer，7.5μl；

25x 的RT-PCR Enzyme Mix，0.6μl；

NF water，1.74μl。

6.如权利要求5所述数字PCR检测方法，其特征在于，数字PCR扩增时，具体PCR反应程序为：45℃、10min；95℃、10min；95℃、50s；57℃、30s，72℃、1min30s，40个循环；72℃、5min；4℃保存。