[发明专利]一种从猪肝中分离的具有强抗氧化性和促进脂质代谢的多肽、制备方法和应用有效
申请号: | 202110573710.3 | 申请日: | 2021-05-25 |
公开(公告)号: | CN113307844B | 公开(公告)日: | 2022-03-01 |
发明(设计)人: | 史蕾;刘成阳;左常熙;逄明祝;郑大川;李海松 | 申请(专利权)人: | 青岛新万福食品有限公司 |
主分类号: | C07K7/06 | 分类号: | C07K7/06;C12P21/06;C07K1/34;C07K1/20;C07K1/14;A23L33/18;A61K38/08;A61P3/10;A61P3/04 |
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地址: | 266623 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 猪肝 分离 具有 氧化 促进 代谢 多肽 制备 方法 应用 | ||
1.一种具有强抗氧化性和促进脂质代谢的多肽,其特征在于,所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1: SEWYREIR所示。
2.一种如权利要求1所述的一种具有强抗氧化性和促进脂质代谢的多肽的制备方法,所述制备方法包括(1)将预处理的猪肝产品经生物酶分段酶解,以便获得酶解液;(2)将所述酶解液进行超滤分离处理,以便获得混合肽;以及(3)将所述混合肽进行反相高效液相色谱纯化分离,以便获得目标肽;其中,酶解步骤为按照猪肝:水为1:1-3的比例,以重量比计,加入纯净水匀浆,用纱布过滤,分离滤液和滤渣;将滤渣重悬于1倍体积的纯净水中,反复冻融3-5次后再次匀浆过滤后收集到的滤液与第一次获得的滤液混合获得猪肝过滤液;将猪肝过滤液进行微波辅助均质,微波功率300-500W、处理5-15分钟;处理后的均质液冷却到室温后调节pH至2.0~3.0,按均质液质量的0.5~2%加入胃蛋白酶在25-30℃下酶解4-6h后,调节pH至6.5-7.0,按照按均质液质量的0.5~2%加入胰蛋白酶和中性蛋白酶,在45~55℃下搅拌酶解4~6h后升温至80-100℃灭酶10min;
其中超滤分离处理步骤为:将酶解灭酶后的均质液过滤后,12000-15000rpm离心10-30分钟,收集上清液;用0.45μm的滤膜抽滤,滤液再依次利用分子量截留范围为1000Da的超滤膜和200Da的纳滤膜对其进行超滤分离,收集分子量在200-1000Da的超滤组分,冷冻干燥后储存于-80℃冰箱中;
其中反相高效液相色谱纯化分离步骤为:将分子量<1000Da的超滤组分冷冻干燥后利用超纯水配置成浓度为10mg/mL,取1mL溶液上柱,柱子1.6cm×100cm,凝胶层析柱的填料为SephadexG-15葡聚糖凝胶树脂,用蒸馏水洗脱,收集吸收峰获得的4个洗脱组分;将收集的4个层析组分分别冷冻干燥后储存于-80℃冰箱中;对获得的4个组分进行抗氧化能力的验证,选择抗氧化能力最强的组分进一步采用反相高效液相色谱方法进行层析,再选择其中抗氧化能力最强的组分进行成分鉴定,确定氨基酸序列。
3.含有权利要求1所述的一种具有强抗氧化性和促进脂质代谢的多肽的产品,所述产品为食品或者保健品。
4.如权利要求1所述的一种具有强抗氧化性和促进脂质代谢的多肽在制备治疗糖尿病和/或肥胖的药物中的应用。
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