[发明专利]支原体清除组合物和处理体外培养细胞的方法

权利要求书

1.一种支原体清除组合物，其特征在于，其包括以下组分：

红霉素，使用终浓度为10～40μM，

氯霉素，使用终浓度为10～40μM，

泰乐菌素，使用终浓度为10～40μM，

环丙沙星，使用终浓度为4μg/mL。

2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述红霉素、氯霉素和泰乐菌素使用时分别溶解于二甲基亚砜；所述环丙沙星使用时溶解于氯化钠。

3.所述支原体清除组合物在处理体外培养细胞中的应用。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述体外培养细胞为肝细胞。

5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述肝细胞为C3A肝癌细胞和HepG2肝癌细胞。

6.所述支原体清除组合物处理体外培养细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：

活化待处理细胞；置换含支原体清除组合物和血清的培养基；连续培养2～3周，直至检测支原体的结果为阴性；

其中，所述支原体清除组合物包括终浓度分别为10～40μM的红霉素、10～40μM的氯霉素、10～40μM的泰乐菌素和4μg/mL的环丙沙星。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述活化待处理细胞的步骤包括：

重悬贴壁生长的待处理细胞；

利用不含血清的培养基贴壁培养至细胞密度为60％～90％；

调整细胞浓度至每50ml培养基细胞数量小于或等于5x10⁶个。

8.如权利要求6或7所述的方法，其特征在于，所述培养基为DMEM细胞培养基或MEM细胞培养基；所述血清为胎牛血清，使用终浓度为10％的体积百分比。

9.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述连续培养2～3周，包括每24小时更换一次新鲜培养基。