[发明专利]转氨酶突变体及其应用

权利要求书

1.一种转氨酶突变体，其特征在于，所述转氨酶突变体：（1）由SEQ ID NO: 2发生氨基酸突变得到，所述氨基酸突变选自如下任意一种：

；

或者

（2）由野生型转氨酶的保守氨基酸突变得到，以野生型CvTA转氨酶的序列SEQ ID NO：1作为参照，所述保守氨基酸发生如下任一种组合突变：（a）L59A+F88A+F89D；（b）L59A+F88A+F89D+N86H；（c）L59A+F88A+F89D+N86H +Y85M，所述野生型转氨酶来源于下表所示的酶编号为1至54中的任意一种：

。

2.一种DNA分子，其特征在于，所述DNA分子编码权利要求1所述的转氨酶突变体。

3.一种重组质粒，其特征在于，所述重组质粒连接有权利要求2所述的DNA分子。

4.一种手性胺化合物的合成方法，其特征在于，采用权利要求1所述的转氨酶突变体在氨基供体的作用下对酮类底物进行转氨基反应，得到所述手性胺化合物；

其中，所述酮类底物为，所述转氨酶突变体为权利要求1中由SEQ IDNO: 2发生氨基酸突变的转氨酶突变体中的任意一种；

所述酮类底物为、、或，所述转氨酶突变体为权利要求1中由SEQ ID NO: 2发生氨基酸突变，且所述氨基酸突变位点为F88A+L59A+Y89D+N86H+Y85M+K90G+T91M+P83S+V234A+L380A+S417I或F88A+L59A+Y89D+N86H+Y85M+K90G+T91M+P83S+V234A+L380A+S417I+A168E+A379L+S424A+F301S+G164S+T452S+M180V+F449L+F320H+Y322T+M91I的转氨酶突变体；或者

所述酮类底物为，所述转氨酶突变体为权利要求1中野生型转氨酶，以SEQ ID NO:1为参照，发生（a）、（b）或（c）中任一种组合突变的突变体。

5.一种手性胺化合物的合成方法，其特征在于，采用转氨酶突变体在氨基供体的作用下对式I所示的酮类底物进行转氨基反应，得到所述手性胺化合物；

式I，

其中，式I所述酮类底物为：

，

所述转氨酶突变体为SEQ ID NO:1基础上发生L59A+Y85M+N86H+F88A+F89D突变的突变体。

6.根据权利要求4或5所述的合成方法，其特征在于，所述氨基供体为异丙胺、异丙胺盐酸盐、丙氨酸、正丁胺或苯胺。