[发明专利]具有DPP-IV抑制功能的牡蛎肽及其制备方法和应用

权利要求书

1.具有DPP-IV抑制功能的牡蛎肽，其特征在于，所述牡蛎肽含有质量百分含量≥60%的功能肽，所述功能肽的序列如SEQ ID NO.1-3任一所示。

2.权利要求1所述的具有DPP-IV抑制功能的牡蛎肽的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：

（1）原料前处理：将牡蛎肉与水混合后经剪切匀浆、超声、均质处理得到原料蛋白液，其中，所述超声的频率为60-90kHz，时间为20-30min；

（2）酶解：按照与原料蛋白的质量比为0.6-3.0%的用量加入复合蛋白酶于45-60℃酶解1-3h，所述复合蛋白酶中，胰蛋白酶与风味蛋白酶的质量之比为（1-4）：1，所述胰蛋白酶的酶活为100,000-1,000,000U/g，所述风味蛋白酶的酶活为80,000-250,000U/g；将得到的酶解物进行灭酶处理，再进行糖化酶酶解，所述糖化酶酶解中，所述糖化酶的用量与原料蛋白的质量比为0.9-1.6%，所述糖化酶的酶活为50,000-150,000U/g，酶解条件为45-60℃酶解0.5-2 h；

（3）去味：步骤（2）酶解结束后先进行灭酶处理、酵母发酵和活性炭处理，再于4000-5000 g离心5-8分钟分离并收获上清液，其中，所述发酵中，酵母的用量与原料的质量比为0.1-0.2%，发酵温度为30-40℃，时间为0.5-1.5 h；

（4）过滤：将步骤（3）得到的上清液先利用孔径为纳米级别的陶瓷膜过滤，滤液再经过纳滤膜过滤处理，收集截留液；

（5）将步骤（4）得到的截留液依次经孔径为5000道尔顿和1000道尔顿的超滤膜，获得分子量小于1000的蛋白肽液；

（6）取步骤（5）得到的分子量为小于1000的蛋白肽液，先经SephadexG-15凝胶分离，洗脱液为去离子水，洗脱峰在280nm下进行检测，收集第1个洗脱峰；再用RP-HPLC反相高效液相色谱分离，分离条件如下：采用C18色谱柱，以含0.1%TFA的水溶液为流动相A，含0.1%TFA的乙腈溶液为流动相B，采用梯度洗脱进行分离：0-5min，5%的流动相B；5-45min，5-45%的流动相B；45-55min，45-5%的流动相B，流速为1 mL/min，收集7.5-12.5分钟分离的蛋白肽溶液；

（7）将步骤（6）得到的肽溶液通过浓缩、冷冻干燥，得到具有DPP-IV抑制功能的牡蛎蛋白肽粉，其中蛋白肽NHPKDST、RGDVPHI或HTSSIHS的含量≥60%。

3.具有DPP-IV抑制功能的多肽，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1-3任一所示。

4.权利要求1所述的具有DPP-IV抑制功能的牡蛎肽或权利要求3所述的具有DPP-IV抑制功能的多肽在制备药品、食品或食品添加剂中的应用；

所述药品或所述食品具有预防或治疗受益于DPP-IV抑制的疾病的功能。

5.含有权利要求1所述的具有DPP-IV抑制功能的牡蛎肽或权利要求3所述的具有DPP-IV抑制功能的多肽的药品、食品或食品添加剂。