[发明专利]具有黄嘌呤氧化酶抑制活性的鳕鱼多肽

说明书

本发明公开了一种具有黄嘌呤氧化酶抑制活性的鳕鱼多肽，其制备方法为：(1)取鳕鱼鱼排，烘干，粉碎；(2)加水制成底物液，加入蛋白酶，酶解得酶解液；所述蛋白酶选自木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶等；(3)酶解液通过G‑15葡聚糖凝胶层析柱分离洗脱，共出现5个洗脱峰，收集F2～F5中的任意一种或两种以上的洗脱液，冻干，即得。本发明还公开了具有黄嘌呤氧化酶抑制活性的小分子肽。本发明的鳕鱼多肽，具有黄嘌呤氧化酶抑制活性。本发明的小分子肽具有黄嘌呤氧化酶抑制(降尿酸)活性，其中YNVTGW还具有良好的DPPH和ABTS自由基清除活性，具有作为抑制尿酸水平和氧化应激的功能性产品的潜力。

技术领域

本发明涉及一种具有黄嘌呤氧化酶抑制活性的鳕鱼多肽，属于酶解加工产品技术领域。

背景技术

鳕鱼鱼排是重要的鳕鱼加工副产品，含有人体必需氨基酸，且氨基酸的比例均衡，生物学效价较高，是优良的蛋白来源。然而其利用程度低，经济附加值低，且如果处理不当，将对环境造成严重威胁。

酶水解是从渔业副产物中有效回收蛋白质的方法之一，可用于改善和提升蛋白质的功能和营养特性，已被广泛应用于风味改善和生物活性肽的生产。

尿酸由黄嘌呤氧化酶依次催化次黄嘌呤和黄嘌呤氧化生成，尿酸的过量生产或排泄减少引发高尿酸血症。高尿酸血症是诸如慢性肾脏疾病、高血压、中风、动脉粥样硬化等健康问题的诱因。目前用于治疗高尿酸血症的药物往往伴随有严重的毒副作用，因此，开发生产成本低、毒副作用小、吸收程度高的食品源降尿酸肽意义重大。

发明内容

针对上述现有技术，为综合利用鳕鱼鱼排，本发明提供了一种具有黄嘌呤氧化酶抑制活性的鳕鱼多肽，其具有高附加值。本发明还提供了具有黄嘌呤氧化酶抑制活性的小分子肽。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种具有黄嘌呤氧化酶抑制活性的鳕鱼多肽，是通过以下方法制备得到的：

(1)取鳕鱼鱼排，烘干(65℃，20h)，粉碎，得鳕鱼排粉，置于-20℃环境，备用；

(2)将鳕鱼排粉与水混合制成固液比为1:4～10(g:ml)的底物液，调节初始pH值为6～11(用氢氧化钠溶液或盐酸调节)，按加酶量300～2400U/g(酶活/鱼排)加入蛋白酶，于45～60℃下震荡反应8h，得酶解液；所述蛋白酶选自木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶或复合风味蛋白酶中的任意一种或两种以上。

进一步地，还包括步骤(3)：所述酶解液通过G-15葡聚糖凝胶层析柱分离洗脱，流动相为超纯水，洗脱速度为2mL/min，共出现5个洗脱峰，收集F2～F5中的任意一种或两种以上的洗脱液，冻干，即得具有鳕鱼多肽产品。

优选的，所述步骤(2)中，固液比为1:5。

优选的，所述步骤(2)中，初始pH值为7.0。

优选的，所述步骤(2)中，加酶量为900U/g。

优选的，所述步骤(2)中，蛋白酶为碱性蛋白酶。

优选的，所述步骤(2)中，酶解温度为45℃。

优选的，所述步骤(2)中，酶解时控制振荡速率为200rpm。

优选的，所述步骤(3)中，G-15葡聚糖凝胶层析柱的规格为26mm×80cm。

优选的，所述步骤(3)中，收集F4或/和F5的洗脱液，经分离富集后的组分F4、F5，对XO的抑制率，较原酶解液、组分F2、组分F3，有显著提高。

小分子肽，其氨基酸序列为：Phe-Phe(FF)。

小分子肽，其氨基酸序列为：Tyr-Phe(YF)。