[发明专利]一组与小麦条锈病抗性显著关联的SNP位点及其在遗传育种中的应用有效
| 申请号： | 202110397710.2 | 申请日： | 2021-04-14 |
| 公开（公告）号： | CN113046467B | 公开（公告）日： | 2023-07-18 |
| 发明（设计）人： | 刘树兵;庞昀龙;刘春霞;赵萌;武玉叶 | 申请（专利权）人： | 山东农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京中知慧专利代理事务所(普通合伙) 11969 | 代理人： | 梁军 |
| 地址： | 271018 *** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一组 小麦 条锈病 抗性 显著 关联 snp 及其 遗传 育种 中的 应用 | ||
1.检测与小麦抗条锈病相关SNP位点的KASP标记引物组合在小麦抗条锈病鉴定中的应用，其特征在于：所述的SNP位点由2个SNP位点组成，编号分别为SNP7、SNP8，它们的信息如下：
表中物理位置以中国春基因组IWGSC reference genome v1.1，2018为参考序列；
所述2个SNP位点基因型与GH9相同的小麦表现为抗条锈病，与烟农19相同的小麦表现为感病，杂合个体的抗病性介于二者之间。
2.检测与小麦抗条锈病相关SNP位点的KASP标记引物组合在制备小麦抗条锈病鉴定试剂盒中的应用，其特征在于：所述的SNP位点由2个SNP位点组成，编号分别为SNP7，SNP8，它们的信息如下：
表中物理位置以中国春基因组IWGSC reference genome v1.1，2018为参考序列；
所述2个SNP位点基因型与GH9相同的小麦表现为抗条锈病，与烟农19相同的小麦表现为感病，杂合个体的抗病性介于二者之间。
3.检测与小麦抗条锈病相关SNP位点的KASP标记引物组合在制备基因芯片中的应用，其特征在于：所述的SNP位点由2个SNP位点组成，编号分别为SNP7，SNP8，它们的信息如下：
表中物理位置以中国春基因组IWGSC reference genome v1.1，2018为参考序列；
所述2个SNP位点基因型与GH9相同的小麦表现为抗条锈病，与烟农19相同的小麦表现为感病，杂合个体的抗病性介于二者之间。
4.根据权利要求1所述的检测方法中的应用，其特征在于，所述应用包括以下步骤：
（1）以小麦DNA为PCR扩增模板，以设计合成的KASP引物，进行PCR扩增；PCR反应体系具体包括：20-50ng/μL的DNA 3μL，2×KASP Master mix 3μL,KASP Assay mix 上下游引物混合液 0.0825μL；置于384孔PCR仪扩增；
（2）PCR扩增程序为:94℃预变性15min；94℃变性20s，65-57℃复性60s；每循环降低0.8℃；10个循环；94℃变性20s，57℃复性60s，30个循环；10℃保存；
（3）PCR结束后，置于Omega SNP分型仪检测PCR分型结果；
（4）分析鉴定，根据分型结果分析基因型。
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