[发明专利]一种产肝素前体的重组大肠杆菌及其应用有效
| 申请号： | 202110392140.8 | 申请日： | 2021-04-10 |
| 公开（公告）号： | CN113881612B | 公开（公告）日： | 2023-04-28 |
| 发明（设计）人： | 康振;王阳;胡珊;堵国成;陈坚 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12P19/26;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 林娟 |
| 地址： | 214000 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 肝素 重组 大肠杆菌 及其 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种重组大肠杆菌，其特征在于，所述重组菌以Eshcherichia coli Nissle 1917为出发菌株，表达了Gene ID为936797的葡萄糖-1-磷酸尿酰胺转移酶、Gene ID为946571的UDP-葡萄糖脱氢酶和Gene ID为947692的磷酸葡萄糖变位酶，并同时表达EscherichiacoliNissle1917来源的β-UDP-葡萄糖醛酸糖基转移酶和α-UDP-N-乙酰葡萄糖胺糖基转移酶。
2.根据权利要求1所述重组大肠杆菌，其特征在于，所述重组大肠杆菌以质粒pETDuet-1，pCDFDuet-1或pACYDuet-1为表达载体。
3.一种生产肝素前体的方法，其特征在于，所述方法为，利用权利要求1或2所述的重组大肠杆菌转化硫胺素生产肝素前体。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，将所述重组菌的细胞加入反应体系中，待OD600＝15-20加入IPTG诱导，待反应体系中葡萄糖浓度在4-6g/L时，补加葡萄糖。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，在35-40℃下培养至反应体系中葡萄糖消耗完结束发酵。
6.权利要求1或2所述的重组大肠杆菌在制备肝素前体中的应用。
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