[发明专利]一种植物乳杆菌中混入干酪类菌株的检测方法

说明书

本发明涉及乳酸菌技术领域，提出了一种植物乳杆菌中混入干酪类菌株的检测方法，包括以下步骤：B1、培养的待测菌粉培养物震荡使凝块充分破碎得B1传代物；B2、用生理盐水稀释B1传代物；B3、选择10³、10⁴、10⁵三个连续的稀释度，每个稀释度吸取样品匀液置于固体显色培养基进行表面涂布；B4、于36℃±1℃厌氧培养48h±2h后观察菌落形态。通过上述技术方案，解决了现有技术中无法对植物乳杆菌中混入干酪类菌株进行检测的问题。

技术领域

本发明涉及乳酸菌技术领域，具体的，涉及一种植物乳杆菌中混入干酪类菌株的检测方法。

背景技术

目前，关于乳酸菌的检测标准，比较常规，包括乳酸菌活菌数检测，遵循GB4789.35；霉菌和酵母检测，遵循GB 4789.15；肠杆菌科检测，遵循SN/T 0738；金黄色葡萄球菌检测，遵循GB 4789.10；单核细胞增生李斯特氏菌，遵循GB 4789.30；目前只有嗜热链球菌计数、德氏乳杆菌保加利亚亚种计数、双歧杆菌计数、嗜酸乳杆菌计数、干酪乳杆菌或鼠李糖乳杆菌计数、明串珠菌计数、乳酸乳球菌计数、片球菌计数这几种方法，但是对于一种乳酸菌中混入另外一种乳酸菌的检测方法没有。植物乳杆菌中混入干酪乳杆菌、副干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌等菌属中的一种或多种时，无法完成检测，这也是难以克服的难题。

植物乳杆菌中混入干酪乳杆菌、副干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌等菌属中的一种或多种时，由于菌落的形态、菌的形状近似时，对菌种的辨别存在困难。

发明内容

本发明提出一种植物乳杆菌中混入干酪类菌株的检测方法，解决了现有技术中无法对植物乳杆菌中混入干酪类菌株进行检测的问题。

本发明的技术方案如下：

一种液体培养基，由以下组分组成：脱脂奶粉质量含量8％～12％，软化水质量含量88％～92％。

本发明还提出一种液体培养基的制作方法，包括以下步骤：按照所述的配方称取备料，将脱脂奶粉加入软化水中，搅拌、静置水合、加热灭菌后待用。

作为进一步的技术方案，控制所述脱脂奶粉加入软化水中的温度为45～50℃，搅拌时间为10～15min，静置水合时间为15～25min，加热灭菌温度为110～120℃，加热时间为15～25min。

本发明还提出一种菌粉的培养方式，包括以下步骤：

S1、制备菌粉稀释液；

S2、将S1所得菌粉稀释液加入按照所述的制作方法制备的液体培养基中，摇匀；

S3、于恒温培养箱中扩培，结束后摇动使凝块破碎，

S4、于室温中放置培养，结束后震荡破碎，待用。

作为进一步的技术方案，所述步骤S3中，恒温培养箱温度控制为37℃±1℃，扩培70～74h；所述步骤S4中，培养温度控制20℃～25℃，培养时间0～24h。

本发明还提出一种植物乳杆菌中混入干酪类菌株的检测方法，包括以下步骤：

B1、取出按照所述的培养方式培养的待测菌粉培养物震荡使凝块充分破碎，得B1传代物；

B2、用生理盐水稀释B1传代物；

B3、选择10³、10⁴、10⁵三个连续的稀释度，每个稀释度吸取样品匀液置于固体显色培养基进行表面涂布；

B4、于36℃±1℃厌氧培养48h±2h后观察菌落形态。