[发明专利]一种植物乳杆菌中混入干酪类菌株的检测方法

权利要求书

1.一种植物乳杆菌中混入干酪类菌株的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

B1、将待测菌粉培养，得到培养物震荡使凝块充分破碎，得B1传代物；

B2、用生理盐水稀释B1传代物；

B3、选择10³、10⁴、10⁵三个连续的稀释度，每个稀释度吸取样品匀液置于固体显色培养基进行表面涂布；

B4、于36℃±1℃厌氧培养48h±2h后观察菌落形态；

所述步骤B1中培养方式包括以下步骤：

S1、制备菌粉稀释液；

S2、将S1所得菌粉稀释液加入液体培养基中，摇匀；

S3、于恒温培养箱中扩培，结束后摇动使凝块破碎；

S4、于室温中放置培养，结束后震荡破碎，待用；

所述步骤S3中，恒温培养箱温度控制为37℃±1℃，扩培70~74h；所述步骤S4中，培养温度控制20℃~25℃，培养时间0~24h；所述步骤S2中液体培养基由以下组分组成：脱脂奶粉质量含量8%~12%，软化水质量含量88%~92%；

所述步骤B3中的固体显色培养基，按照重量份包括以下组分：麦芽糖8~12份、酵母粉4~6份、胨6~14份、L-半胱氨酸盐酸盐0.4~0.8份、乙酸钠4~6份、磷酸氢二钾2~4份、柠檬酸三铵2~4份、硫酸镁0.2~0.5份、硫酸锰0.02~0.06份、琼脂13~17份、吐温1~2份、蒸馏水900~1000份；还包括万古霉素0.01~0.015份、溴甲酚紫乙醇溶液0.003~0.004份。

2.根据权利要求1所述的植物乳杆菌中混入干酪类菌株的检测方法，其特征在于，所述液体培养基的制作方法，包括以下步骤：按照权利要求1的配方称取备料，将脱脂奶粉加入软化水中，搅拌、静置水合、加热灭菌后待用。

3.根据权利要求1所述的植物乳杆菌中混入干酪类菌株的检测方法，其特征在于，所述液体培养基的制作方法中，控制所述脱脂奶粉加入软化水中的温度为45~50℃，搅拌时间为10~15min，静置水合时间为15~25min，加热灭菌温度为110~120℃，加热时间为15~25min。

4.根据权利要求1所述的植物乳杆菌中混入干酪类菌株的检测方法，其特征在于，固体显色培养基的制备包括以下步骤：

A1、按照权利要求1所述的固体显色培养基配方称取原料备用；

A2、将麦芽糖、酵母粉、胨、L-半胱氨酸盐酸盐、乙酸钠、磷酸氢二钾、柠檬酸三铵、硫酸镁、硫酸锰、琼脂、吐温溶解于蒸馏水中，加热煮沸至完全溶解，高压灭菌，冷却得A2培养基；

A3、将万古霉素加入所述A2培养基中，得到A3培养基备用；

A4、将溴甲酚紫乙醇溶液加入所述A3培养基，混匀后倾注平板得显色培养基备用。

5.根据权利要求1所述的植物乳杆菌中混入干酪菌株的检测方法，其特征在于，所述待测菌粉属包括属于植物乳杆菌的微生物、属于干酪乳杆菌的微生物、属于副干酪乳杆菌的微生物、属于鼠李糖乳杆菌的微生物中的至少1种微生物。