[发明专利]一种冷冻干燥保护剂在制备疫苗中的用途

说明书

本发明提供一种冷冻干燥保护剂在制备疫苗中的用途，属于疫苗制备技术领域，该疫苗的制备方法包括将空白脂质体与抗原液混合，加入冷冻干燥保护剂，后置于‑19℃至‑21℃预冻24‑28h，预冻结束后放入冷冻干燥机中‑79℃至‑81℃抽真空28‑34h，得到疫苗脂质体；所述冷冻干燥保护剂中包括海藻糖、L‑谷氨酸钠、质量比为1.2‑1.7:1的十二烷基肌氨酸钠和神经酰胺。本发明提供的一种冷冻干燥保护剂用于制备疫苗时，能够抑制疫苗脂质体在冻干及贮藏过程中结构的破坏，提高疫苗的免疫效力，且能够延长疫苗的保存期限，方便运输和贮藏。

技术领域

本发明属于疫苗制备技术领域，具体涉及一种冷冻干燥保护剂在制备疫苗中的用途。

背景技术

脂质体作为药物载体具有提高药物疗效、减轻药物不良反应及靶向作用等特点，但脂质体(特别是采用含有不饱和键脂质制备的脂质体)在水性介质中稳定性差成为限制其应用的重要因素。为了克服脂质体制剂长期贮存时的物理和化学不稳定性问题，可将脂质体冷冻干燥，给药前再以适当介质水化成为脂质体混悬液。一般而言，脂质体的双层膜结构对冷冻和干燥工艺敏感，加入适宜的冻干保护剂则可减弱或者消除冻干工艺对脂质体造成的破坏。脂质体冻干产品水化后性状会发生一系列变化，如粒径增大以及单室脂质体向多室脂质体转变等，这些现象表明，冷冻干燥过程会导致脂质体的聚集与融合，同时伴随脂质体内容物的渗漏。解决这些问题的方法之一是加入冻干保护剂，抑制脂质体的融合，保证冻干脂质体再水化后有较高的内容物保留率。

冷冻干燥是有效的改善脂质体制剂长期稳定性的方法之一，但冻干所涉及的预冻和干燥等过程不利于脂质体结构和功能的稳定，而冻干保护剂可有效降低冻干过程对脂质体造成的不利影响。

现有技术如授权公告号为CN 107174663 B的中国发明专利，公开了一种疫苗冻干保护剂，按重量份数计，包括填充剂40-60份；防冻剂10-15份；酸碱调节剂3-10份；抗氧化剂2-15份；透明质酸20-30份；聚天冬氨酸10-25份。该发明具有以下优点和效果：采用在疫苗冻干保护剂内加入填充剂，冻干过程中起到保护活疫苗的作用。防冻剂能够防止和减少冷冻过程中结晶水的形成，提高活疫苗冻干过程中的存活率。加入抗氧化剂，延长冻干活疫苗的保存时间。疫苗冻干保护剂内加入透明质酸和聚天冬氨酸后混合，包裹活疫苗形成一层保护层，提高冻干活疫苗的耐热性和延长保存时间，达到了提高活疫苗冻干过程中的存活率、提高冻干活疫苗的耐热性、延长冻干活疫苗的保存时间的效果。

发明内容

本发明的目的在于提供一种冷冻干燥保护剂及其在制备疫苗中的用途，该冷冻干燥保护剂能够抑制疫苗脂质体在冻干及贮藏过程中结构的破坏，提高疫苗的免疫效力，且能够延长疫苗的保存期限，方便运输和贮藏。

本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：

提供一种疫苗脂质体的制备方法，包括以下步骤：

将空白脂质体与抗原液混合，加入冷冻干燥保护剂，后置于-19℃至-21℃预冻24-28h，预冻结束后放入冷冻干燥机中-79℃至-81℃抽真空28-34h，得到疫苗脂质体；

上述冷冻干燥保护剂包括海藻糖、L-谷氨酸钠、质量比为1.2-1.7:1的十二烷基肌氨酸钠和神经酰胺。质量比为1.2-1.7:1的十二烷基肌氨酸钠和神经酰胺的加入，能够抑制冻干及贮藏过程中脂质体结构的破坏，抑制脂质体冻干过程中内容物的泄露，提高脂质体的包封率和疫苗的稳定性，能够延长保存期，便于运输和贮藏，提高疫苗的免疫效力。

在本发明中，上述冷冻干燥保护剂还包括VE和聚乙烯吡咯烷酮。

在本发明中，上述冷冻干燥保护剂的各组分及其含量包括：20-25g/L海藻糖、0.4-0.8g/L VE、0.8-1.5g/L L-谷氨酸钠、2.5-4g/L聚乙烯吡咯烷酮、0.2-0.7g/L十二烷基肌氨酸钠、0.1-0.4g/L神经酰胺，其余为水。

在本发明中，上述疫苗包括但不限于狂犬疫苗或流感疫苗。