[发明专利]一种纳入分子分型和免疫评分的子宫内膜癌预后评价系统

说明书

本发明一种基于分子分型、免疫评分和病理形态学诊断的子宫内膜癌预后评价系统(MIP评分)，用于判断子宫内膜癌的预后。通过测序判断POLE突变状态和免疫组化方法检测4中错配修复蛋白及p53确定分子分型；免疫组化的方法检测肿瘤间质免疫细胞中VISTA的表达，进行免疫评分。通过镜下观察病理形态学判断肿瘤的组织学级别及淋巴脉管间隙浸润(LVSI)。分别赋予复发风险分值。该预后评价系统可以有效区分子宫内膜癌的复发和死亡风险。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，尤其是涉及子宫内膜癌预后。

背景技术

子宫内膜癌是较常见的妇科恶性肿瘤，在我国其发病率约为60/10万，死亡率约为20/10万，发病率呈上升趋势。2015年中国新发病例6万余例，死亡病例2万余例。子宫内膜癌最常见的治疗方法是以手术为主，根据术后病理报告，有高危因素者联合术后近距离腔内放疗或盆腔外放疗或化疗等辅助治疗。病理诊断是术后辅助治疗的主要依据。2014版《WHO女性生殖器官肿瘤组织学分类》中将内膜癌分为了九大类，即子宫内膜样癌、浆液性癌、黏液性癌、透明细胞癌、神经内分泌癌、混合性癌、未分化/去分化癌、癌肉瘤等。各种病理类型预后不一，其中子宫内膜样癌预后较好，非内膜样癌的预后较差。目前在临床中的应用最为广泛的是欧洲肿瘤内科学会的ESMO风险分层标准^[1]，该标准主要纳入了FIGO分期、组织学类型、肿瘤分化程度、肌层浸润深度及淋巴脉管间隙浸润(LVSI)，根据高危因素将内膜癌划分为低危、中危、高中危、高危组。具体风险分层如下：

2013年，美国癌症基因组图谱计划(TCGA)基于全基因组分析提出了子宫内膜癌的分子分型，该分型将子宫内膜癌分成4种类型：DNA多聚酶E(polymerase E，POLE)超突变型、微卫星不稳定型(microsatellite instability，MSI)、低拷贝数型/微卫星稳定型和高拷贝数型。不同分子类型患者的预后不同，其中POLE超突变型预后最好，高拷贝数型预后最差。该分子分型对于子宫内膜癌的诊断及治疗有重要的意义^[2]。国外的学者提出了一种简便、经济的前瞻性分子分类工具来代替高通量测序，该方法通过POLE的核酸外切酶结构域突变(exonuclease domain mutations，EDM)测序方法来确定POLE突变型，然后通过免疫组化法检测错配修复蛋白表达来确定错配修复缺陷(deficient mismatch repair，dMMR)的类型，最后根据p53免疫组化结果将其他病例分为p53突变型和p53野生型^[3]。该方法最终分为POLE突变型、dMMR型、p53突变型及无特定分子特征型(NSMP,non-specific molecularprofile)。替代分子分型的检测流程见图1。这种模型已经被多个团队验证，对于指导子宫内膜癌分子分型、危险分级和指导治疗具有重要的意义^[4]。

ESMO风险分层标准的制定是以病理诊断为基础的。然而，由于使用不同病理标准、对相同病理诊断标准解读不同、肿瘤形态学模糊不清导致难以分类，10％～20％的子宫内膜癌病理存在分歧；在高级别肿瘤中，高达26％～37％的比例组织形态学上很难区分其病理类型，病理诊断不一致^[5,6]。一项研究中，3名妇科肿瘤病理医师分别对56例高级别子宫内膜样癌进行组织学鉴别，诊断结果的不一致率高达62.5％。这种以形态学病理诊断为基础的ESMO风险分层影响了子宫内膜癌患者治疗策略的选择，导致部分内膜癌患者的过度治疗或治疗不足。因此，目前有必要建立一种客观的、重复性更高的、对判断预后和指导治疗更精准的分类方法。

TCGA子宫内膜癌分子分型基于高通量深度测序提出的，高通量测序经济成本高、耗时较长会限制了分子分型在临床中的应用。后来学者提出的TCGA的替代分型方案虽然被多个团队证明有效，然而TCGA分型和替代分型都并不能有效区分占60％–70％的dMMR型和NSMP的预后。该分子分型中并未纳入常规的病理参数，也没有纳入肿瘤微环境中的免疫相关分子。综上，有必要建立一种纳入分子分型、形态学病理诊断及肿瘤微环境中免疫分子的综合预后评分系统，同时这个预后评分系统必须具备客观、临床可行和重复性高的特点。