[发明专利]一种用于核酸转染的多肽载体及其应用

说明书

本发明公开了一种用于核酸转染的多肽载体及其应用，包括：外壳以及由多肽与核酸组成的内核，其特征在于，多肽载体表面带负电荷或电中性的具有靶向基团的生物大分子药物输送纳米颗粒，外壳是由不规整的阳离子脂质膜和聚阴离子先后紧密覆盖包裹组成；阳离子脂质膜具有阳离子双层磷脂膜，聚阴离子通过静电和氢键作用包裹在纳米颗粒的表面，阳离子脂质膜是由阳离子脂质与中性脂质或胆固醇或两亲性分子形成的阳离子脂质体或阳离子胶束，聚阴离子选自透明质酸或透明质酸衍生物。暴露出来的阳离子脂质膜通过融膜作用突破内涵体膜，将多肽、核酸，以及二者的复合物释放在细胞浆中，实现了利用靶向HER2高表达的癌症的抗体、多肽和核酸的联合治疗。

技术领域

本发明涉及多肽载体的制备及应用领域，尤其涉及一种用于核酸转染的多肽载体及其应用。

背景技术

多肽是α－氨基酸以肽键连接在一起而形成的化合物，是蛋白质水解的中间产物。由两个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫做二肽，同理类推还有三肽、四肽、五肽等。通常由10-100个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫多肽。一般肽中含有的氨基酸的数目为二到九,根据肽中氨基酸的数量的不同,肽有多种不同的称呼：由两个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫做二肽，同理类推还有三肽、四肽、五肽等，一直到九肽。通常由10~100个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫多肽，它们的分子量低于10,000Da（Dalton，道尔顿），能透过半透膜，不被三氯乙酸及硫酸铵所沉淀。也有文献把由2~10个氨基酸组成的肽称为寡肽（小分子肽）；10~50个氨基酸组成的肽称为多肽；由50个以上的氨基酸组成的肽就称为蛋白质，换言之，蛋白质有时也被称为多肽。多肽也简称为肽，是20世纪被发现的。

活性肽主要控制人体的生长、发育、免疫调节和新陈代谢，它在人体处于一种平衡状态，若活性肽减少后，人体的机能发生重要变化，对于儿童来说，他的生长、发育变得缓慢，甚至停止，长久下去就形成了侏儒，对成年人或老年人，缺少活性肽后，自身的免疫力就会下降，新陈代谢紊乱，内分泌失调，引起各种疾病的产生，如失眠、身体消瘦或浮肿。由于活性肽还作用于神经系统，因此人体就会变得动作迟缓，头脑不再聪慧，更主要的是活性肽减少，直接引起人身体各部位逐渐出现全面衰老，引发各种疾病。

受体导向的多肽靶向药物载体小片段多肽具有低毒性、靶向性、无免疫原性、良好的生物相容性等特点肿瘤细胞表面会高表达多肽类受体，因此一些短肽可作为导向物，以配体受体特异性结合的方式应用于靶向药物递送系统。但目前关于核酸转染的多肽载体的制备与应用并不完善，难以达到预期的效果。

发明内容

本发明克服了现有技术的不足，提供一种用于核酸转染的多肽载体及其应用。

为达到上述目的，本发明采用的技术方案为：一种用于核酸转染的多肽载体及其应用，包括：外壳以及由多肽与核酸组成的内核，其特征在于，所述多肽载体表面带负电荷或电中性的具有靶向基团的生物大分子药物输送纳米颗粒，所述外壳是由不规整的阳离子脂质膜和聚阴离子先后紧密覆盖包裹组成。

所述阳离子脂质膜具有阳离子双层磷脂膜，所述聚阴离子通过静电和氢键作用包裹在所述纳米颗粒的表面，所述阳离子脂质膜是由阳离子脂质与中性脂质或胆固醇或两亲性分子形成的阳离子脂质体或阳离子胶束，所述聚阴离子选自透明质酸或透明质酸衍生物。

本发明所采用的第二种技术方案为：

步骤S1：将多肽药物与阳离子多肽通过可降解键连接起来获得序列为SEQIDNo.1的多肽，然后将多肽与阳离子脂质体混合，得到混合液。

步骤S2：将步骤S1中的混合液加入到核酸药物中孵育制备得到三元纳米颗粒。

步骤S3：向所述三元纳米颗粒中加入透明质酸钠，再加入到核酸中，常温孵育，制得表面带正电荷的纳米颗粒。

步骤S4：将所述表面带正电荷的纳米颗粒通过酰胺键将抗体赫赛汀与透明质酸连接的透明质酸-赫赛汀溶液混合均匀，组装成带负电荷或电中性的纳米颗粒即得到用于核酸转染的多肽载体。