[发明专利]一种氨基酸发酵培养基的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种L-缬氨酸发酵培养基的制备方法，包括如下步骤：将分离L-缬氨酸晶体后所收集的L-缬氨酸结晶母液加水稀释1-5倍，加入新鲜培养基，混合均匀，再加入葡萄糖溶液，制得L-缬氨酸发酵培养基，其中，每立方米L-缬氨酸结晶母液中所加入的新鲜培养基的组成为：酵母膏2-7kg、蛋白胨1-6kg、硫酸铵10-25kg、柠檬酸0.1-2kg、氯化钾0.1-2kg、硫酸镁0.5-5kg；

所述L-缬氨酸结晶母液的制备方法包括下述步骤，将L-缬氨酸发酵液经灭菌、分离一、脱色、分离二、浓缩、结晶、分离三的处理后，收集L-缬氨酸晶体和L-缬氨酸结晶母液；

所述L-缬氨酸发酵液由L-缬氨酸生产菌经发酵培养得到；所述L-缬氨酸生产菌选自Sval031菌株、Sval049菌株、Sval065菌株中任一种；所述Sval031菌株保藏编号为CGMCCNo.19456；所述Sval049菌株保藏编号为CGMCC No.19457；所述Sval065菌株保藏编号为CGMCC No. 19458。

2.根据权利要求1所述的制备方法，L-缬氨酸结晶母液加水稀释后体积：葡萄糖溶液体积为1:0.8-1.2。

3.根据权利要求1所述的制备方法，L-缬氨酸结晶母液加水稀释后体积：葡萄糖溶液体积为1:0.9-1.1。

4.根据权利要求1所述的制备方法，L-缬氨酸结晶母液加水稀释后体积：葡萄糖溶液体积为1:1。

5.根据权利要求1所述的制备方法，所述葡萄糖溶液的浓度为200-400g/L。

6.根据权利要求1所述的制备方法，所述葡萄糖溶液的浓度为240~340g/L。

7.根据权利要求1所述的制备方法，所述葡萄糖溶液的浓度为260~300g/L。

8.根据权利要求1所述的制备方法，所述加入新鲜培养基后的L-缬氨酸结晶母液和葡萄糖溶液，分别灭菌后再混合。

9.一种L-缬氨酸的发酵方法，包括下述步骤，将L-缬氨酸生产菌种子培养液按照0.5-10%的接种量接种到L-缬氨酸结晶母液制得的发酵培养基中，在35-37℃条件下发酵，至残糖量小于0.05g/L，获得L-缬氨酸发酵液；

所述L-缬氨酸生产菌选自Sval031菌株、Sval049菌株、Sval065菌株中任一种；所述Sval031菌株保藏编号为CGMCC No.19456；所述Sval049菌株保藏编号为CGMCC No.19457；所述Sval065菌株保藏编号为CGMCC No. 19458；

所述发酵培养基通过权利要求1-8任一项所述L-缬氨酸发酵培养基的制备方法制备得到。

10.根据权利要求9所述的发酵方法，所述L-缬氨酸生产菌种子培养液的培养方法，包括下述步骤：将L-缬氨酸生产菌按照接种量为0.5-5%接种到LB培养基中，将其置于35-37℃、180-220r/min、pH6-7条件下培养至OD值2-4，得到LB种子液；将LB种子液按照0.5-5%接种量转接至合成培养基中，将其置于35-37℃、180-220r/min、pH6-7条件下培养至OD值3-4，即得。

11.根据权利要求9-10任一项所述的发酵方法，所得L-缬氨酸生产菌种子培养液可重复加入合成培养基中，进行多次培养。

12.根据权利要求11所述的发酵方法，所述多次为≥2次。