本发明提供了一种外源表达丙氨酸消旋酶的重组菌及其应用，该外源表达丙氨酸消旋酶的重组菌为表达丙氨酸消旋酶的枯草芽孢杆菌，丙氨酸消旋酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示；通过构建含丙氨酸消旋酶编码基因的重组表达载体转化至枯草芽孢杆菌中得到，丙氨酸消旋酶编码基因具有如SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列；该重组菌可用于制备含丙氨酸消旋酶的发酵液。经过诱导表达的重组菌的发酵液或含丙氨酸消旋酶的发酵液可用于催化L‑丙氨酸合成DL‑丙氨酸，L‑丙氨酸转化率高，副产物少，发酵时间短，成本低等，适用于工业化生产。
本发明涉及一种重组毕赤酵母菌的构建方法，包括如下步骤：(1)将L‑天冬氨酸β‑脱羧酶基因aspD与毕赤酵母表达载体pPIC9K连接，构建重组质粒pPIC9K‑aspD，然后转化到大肠杆菌DH5α中，获得重组菌株DH5α/pPIC9K‑aspD；所述L‑天冬氨酸β‑脱羧酶氨基酸序列如序列表中的SEQ ID No.1所示，基因序列如SEQ ID No.2所示；(2)将重组质粒pPIC9K‑aspD在毕赤酵母GS115中成功表达，得到高产稳定性重组毕赤酵母菌株GS115/pPIC9K‑aspD。利用毕赤酵母菌制备得到的L‑天冬氨酸β‑脱羧酶的酶活高且稳定，用于生产L‑丙氨酸，具有发酵时间短，转化速度快，生产效率高，副产物少，成本低等优点。
本发明涉及一种重组枯草芽孢杆菌的构建方法，包括如下步骤：(1)将L‑天冬氨酸β‑脱羧酶基因aspD与枯草芽孢杆菌表达质粒连接，构建重组质粒；所述L‑天冬氨酸β‑脱羧酶氨基酸序列如序列表中的SEQ ID No.1所示，基因序列如SEQ ID No.2所示；(2)重组质粒转化入枯草芽孢杆菌中，得到重组枯草芽孢杆菌。利用该重组枯草芽孢杆菌发酵得到的L‑天冬氨酸β‑脱羧酶含酶液，酶活高且稳定，用于生产L‑丙氨酸，具有转化时间短，转化速度快，生产效率高，副产物少，成本低等优点，适用于工业化生产。
