[发明专利]鉴别黄河鲤遗传性别的分子标记、引物、试剂盒及应用

说明书

本发明提供了一种鉴别黄河鲤遗传性别的分子标记、引物、试剂盒及应用。该鉴别黄河鲤遗传性别的分子标记为从黄河鲤基因组信息中筛选到的雄性特异序列，其存在于黄河鲤的雄性遗传性特征区域(即相当于性别遗传决定型Y的表征)，而不出现于雌性黄河鲤基因组中(即对应于XX性别遗传型)。并针对该鉴别黄河鲤遗传性别的分子标记设计了相应的特异性引物和试剂盒，并基于上述引物和试剂盒，建立了用于黄河鲤遗传性别鉴定的PCR技术，可以快速、准确区分黄河鲤的遗传性别；该鉴别体系可用于对不同生长阶段和不同群体的黄河鲤性别鉴定和筛选，对研究黄河鲤性别决定和分化机制、实现其性别控制具有重要意义。

技术领域

本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种鉴别黄河鲤遗传性别的分子标记、引物、试剂盒及应用。

背景技术

鱼类等水产动物的养殖已成为人类获取动物蛋白的一个主要途径，鱼类养殖对世界动物蛋白的持续供给做出了至关重要的贡献。鱼类中广泛存在个体大小和外部形态、颜色特征的两性差异，称为鱼类的两性异形或者性别二态性。不少鱼类在个体大小等重要生产性状上表现出显著的两性异形，而这种生产性状的经济价值与性别密切相关。

例如：黄河鲤雌性的生长速度显著快于雄性(尤其是幼年期后)，使得开发黄河鲤的单性育种与单性养殖技术具有较为重要的经济价值。尽管个体在性别上存在大小差异，但在性腺发育成熟之前，黄河鲤的雌鱼和雄鱼却很难从外部形态上加以区分，胚胎和幼体阶段雌雄鱼形态上更是难以区别，这给其单性育种、养殖以及对研究黄河鲤性别决定和分化机制等相关的遗传学基础研究带来很大的阻碍。

随着分子生物学技术的发展，基于DNA多态性的分子标记被开发出来，如：限制性片段长度多态性(RFLP)、随机扩增多态性DNA(RAPD)、扩增片段长度多态性(AFLP)、微卫星标记(microsatellite)和单核苷酸多态性(SNP)等等。一些鱼类的性别特异分子标记已经被开发出来，而不同物种其基因组DNA序列结构不同，其不能对不同种的遗传性别进行鉴定，只能针对不同物种分别进行开发。迄今为止，可以鉴别黄河鲤遗传性别的分子标记国内外都未见报道。

有鉴于此，有必要设计一种改进的鉴别黄河鲤遗传性别的分子标记、引物、试剂盒及应用，以解决上述问题。

发明内容

为解决现有依据形态学鉴定方式存在的外观形态难以鉴定区分黄河鲤雌雄性别的问题，本发明的目的在于提供一种鉴别黄河鲤遗传性别的分子标记、引物、试剂盒及应用，有助于快速准确鉴别黄河鲤遗传性别，为开展黄河鲤单性育种工作以及生殖发育与性别分化遗传学研究建立基础。

为实现上述发明目的，本发明提供了一种鉴别黄河鲤遗传性别的分子标记，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

作为本发明的进一步改进，所述鉴别黄河鲤遗传性别的分子标记为黄河鲤雄性特异性序列，其存在于黄河鲤的雄性遗传性特征区域，但在雌性黄河鲤的基因组中缺失。

为实现上述发明目的，本发明还提供了一种用于检测上述鉴别黄河鲤遗传性别的分子标记的引物。所述引物针对所述鉴别黄河鲤遗传性别的分子标记的核苷酸序列进行设计，包括上游引物和下游引物；

所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；

所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

作为本发明的进一步改进，所述引物的检测过程为：利用所述引物对待测黄河鲤基因组DNA进行PCR扩增，并检测扩增片段的长度；

当扩增片段为一条1209bp的条带时，所述待测黄河鲤含有具有SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的雄性遗传性特征区域，鉴别为遗传性别为雄性的黄河鲤；

当没有出现扩增条带时，所述待测黄河鲤鉴别为遗传性别为雌性的黄河鲤。