[发明专利]鉴别黄河鲤遗传性别的分子标记、引物、试剂盒及应用

权利要求书

1.一种用于检测鉴别黄河鲤遗传性别的分子标记的引物，其特征在于：所述引物为针对鉴别黄河鲤遗传性别的分子标记的核苷酸序列进行特异性设计的引物，包括上游引物和下游引物；

所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；

所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；

所述鉴别黄河鲤遗传性别的分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；

所述鉴别黄河鲤遗传性别的分子标记为黄河鲤雄性特异性序列，其存在于黄河鲤的雄性遗传性特征区域，但在雌性黄河鲤基因组中缺失。

2.根据权利要求1所述的用于检测鉴别黄河鲤遗传性别的分子标记的引物，其特征在于：所述引物的检测过程为：利用所述引物对待测黄河鲤基因组DNA进行PCR扩增，并检测扩增片段的长度，再基于所述扩增片段的长度，鉴别所述待测黄河鲤的遗传性别；

当扩增片段为一条1209bp的条带时，所述待测黄河鲤含有具有SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的雄性遗传性特征区域，鉴别为遗传性别为雄性的黄河鲤；

当没有出现扩增条带时，所述待测黄河鲤鉴别为遗传性别为雌性的黄河鲤。

3. 根据权利要求2所述的用于检测鉴别黄河鲤遗传性别的分子标记的引物，其特征在于：所述PCR扩增的体系为：浓度为50ng/μL的DNA模板1μL、10× buffer 2μL、浓度为2.5mM的dNTP 1μL、浓度为10μM的上下游引物各0.5μL、浓度为5Units/μL的Taq酶0.3μL，补充水至20μL。

4. 根据权利要求2所述的用于检测鉴别黄河鲤遗传性别的分子标记的引物，其特征在于：所述PCR扩增的程序为：94℃ 5min；94℃ 30s、56℃ 30s、72℃ 30s，38个循环；72℃5min延伸。

5.一种用于检测鉴别黄河鲤遗传性别的分子标记的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括权利要求1至4中任一项权利要求所述的用于检测鉴别黄河鲤遗传性别的分子标记的引物。

6.根据权利要求5所述的用于检测鉴别黄河鲤遗传性别的分子标记的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒的检测方法为：利用所述试剂盒对待测黄河鲤基因组DNA进行PCR扩增，检测扩增片段的长度；基于所述扩增片段的长度，鉴别所述待测黄河鲤的遗传性别；

所述PCR扩增的体系为：浓度为50ng/μL的DNA模板1μL、10× buffer 2μL、浓度为2.5mM的dNTP 1μL、浓度为10μM的上下游引物各0.5μL、浓度为5Units/μL的Taq酶0.3μL，补充水至20μL；

所述PCR扩增的程序为：94℃ 5min；94℃ 30s、56℃ 30s、72℃ 30s，38个循环；72℃5min延伸。

7. 根据权利要求6所述的用于检测鉴别黄河鲤遗传性别的分子标记的试剂盒，其特征在于：基于所述扩增片段的长度，当扩增片段为一条1209bp的条带时，所述待测黄河鲤含有具有SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的雄性遗传性特征区域，鉴别为遗传性别为雄性的黄河鲤；

当没有出现扩增条带时，所述待测黄河鲤鉴别为遗传性别为雌性的黄河鲤。

8.权利要求1至4中任一项权利要求所述的用于检测鉴别黄河鲤遗传性别的分子标记的引物，或者权利要求5至7中任一项权利要求所述的用于检测鉴别黄河鲤遗传性别的分子标记的试剂盒在黄河鲤遗传性别鉴定中的应用。