[发明专利]一种用于检测药物代谢相关SNP位点的引物组及其方法在审
申请号: | 202110260045.2 | 申请日: | 2021-03-10 |
公开(公告)号: | CN112831557A | 公开(公告)日: | 2021-05-25 |
发明(设计)人: | 梅艳巧;谢桂贞;陈佳颖;杨帆;王博 | 申请(专利权)人: | 上海浦东解码生命科学研究院 |
主分类号: | C12Q1/6883 | 分类号: | C12Q1/6883;C12Q1/6858;C12N15/11 |
代理公司: | 上海愉腾专利代理事务所(普通合伙) 31306 | 代理人: | 唐海波 |
地址: | 200136 上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 药物 代谢 相关 snp 引物 及其 方法 | ||
1.一种用于检测药物代谢相关SNP位点的引物组,其特征在于,所述药物代谢相关SNP位点包括:12s rRNA、rs267606617、rs1876828、rs4244285、rs4986893、rs1799853、rs1057910、rs1065852、rs776746、rs37973、rs3909184、rs2844682、rs730012、rs3812718;所述引物组序列如SEQ ID NO.1~28。
2.根据权利要求1所述的一种用于检测药物代谢相关SNP位点的引物组,其特征在于,所述引物组还包括SEQ ID NO.29~42所示的14个单碱基延伸引物。
3.一种用于检测药物代谢相关SNP位点的方法,其特征在于,所述用于检测药物代谢相关SNP位点的方法包括以下步骤:
合成引物序列:合成权利要求1至2任一所述的用于检测药物代谢相关SNP位点的引物组;
多重PCR扩增SNP位点基因片段:将合成的引物组通过多重PCR扩增体系一次扩增覆盖所述用于检测药物代谢相关SNP位点的个性化用药基因片段;
单碱基延伸SNP位点:通过多重单碱基延伸体系一次延伸个性化用药基因的SNP位点;
上机检测基因型:通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱方法,检测数据并分析各突变位点的基因型。
4.根据权利要求3所述的一种用于检测药物代谢相关SNP位点的方法,其特征在于:所述方法还包括虾碱性磷酸酶消化反应的步骤,多重PCR扩增SNP位点基因片段后进行虾碱性磷酸酶消化反应,进行了虾碱性磷酸酶消化反应后再进行单碱基延伸SNP位点。
5.根据权利要求3所述的一种用于检测药物代谢相关SNP位点的方法,其特征在于:所述多重PCR扩增体系为一个混合多种成分在单个孔内的扩增反应体系。
6.根据权利要求3所述的一种用于检测药物代谢相关SNP位点的方法,其特征在于:所述多重PCR扩增体系所需的试剂包括Nuclease-Free Water、10×PCR Buffer、MgCl2、dNTPMix、PCR扩增引物Mix、基因组DNA和PCR Enzyme。
7.根据权利要求3所述的一种用于检测药物代谢相关SNP位点的方法,其特征在于:所述多重单碱基延伸体系所需的试剂包括Nuclease-Free Water、iPLEX Buffer Plus、iPLEXTermination mix、单碱基延伸引物Mix和iPLEX Enzyme。
8.根据权利要求4所述的一种用于检测药物代谢相关SNP位点的方法,其特征在于:所述虾碱性磷酸酶消化反应所需的试剂包括Nuclease-Free Water、SAP Buffer和ShrimpAlkal ine Phosphatase Enzyme。
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