[发明专利]山地虎耳草中新的二芳基壬烷类Ⅰ自由基抑制剂及其分离制备工艺和应用

说明书

本发明公开了山地虎耳草中新的二芳基壬烷类Ⅰ自由基抑制剂及其分离制备工艺和应用。具体制备工艺为：提取、在线自由基抑制剂组分筛选、微孔树脂柱中压色谱粗分、在线自由基抑制剂筛选及反相制备柱制备五个步骤。上述方法制得的山地虎耳草中新的二芳基壬烷类SaximonsinA自由基抑制剂可在制备自由基抑制药物或保健食品中应用，具体作为有效成分按药学上或者食品科学上可接受的任何载体制成各类药用制剂或者保健类食品。本发明制备工艺中的提取溶剂、微孔树脂柱、反相色谱柱分离溶剂及反相色谱分离用材均可回收利用；原料来源广泛，甲醇室温冷浸提取等工艺步骤均可实现规模化操作，且高压反相制备色谱分离可以保证产品的纯度大于95％。

技术领域

本发明涉及山地虎耳草中新的二芳基壬烷类自由基抑制剂分离技术领域，具体涉及山地虎耳草中新的二芳基壬烷类Ⅰ自由基抑制剂及其分离制备工艺和应用。

背景技术

山地虎耳草(Saxifraga montana)，为虎耳草科(Saxifragaceae)虎耳草属(Saxifraga)的多年生草本植物，藏药名：“寒仁交木”，主要分布在中国陕西、青海、四川西部、云南西北部及西藏东部和南部。主要功效：清热解毒，平肝潜阳。主治肝胆湿热、脾胃湿热，痈肿疮毒用于肝阳上亢所致的头痛。现代药理学研究证明酚类是虎耳草属植物主要活性成分。文献报道，酚类化合物具有良好的清除自由基活性。为了进一步加快山地虎耳草的质量评价、生产销售及相关新药的研发步伐，有必要从中挖掘其潜在的活性成分。

目前，仅有一篇有关山地虎耳草中化学成分(Diversity ofchemicalconstituents from Saxifraga montana,Jun-Xi Liu,Duo-Long Di,Yan-Ping Shi,2008,55,863-870)研究报道，该研究利用传统植物化学手段从山地虎耳草中分离鉴定了包括苯丙素类、苯甲酸类、黄酮类、萜类等18个化合物。有关山地虎耳草中自由抑制剂的分离制备工艺及其应用并未见文献报道。因此，亟需建立一种工艺简单、规模化从山地虎耳草中分离制备新的二芳基壬烷类自由基抑制剂的方法。

发明内容

基于上述技术问题，本发明的目的是提供山地虎耳草中新的二芳基壬烷类Ⅰ自由基抑制剂及其分离制备工艺和应用。

本发明保护山地虎耳草中新的二芳基壬烷类Ⅰ自由基抑制剂，其中，该二芳基壬烷类Ⅰ自由基抑制剂呈棕色油状，其名称为二芳基壬烷类Saximonsin A自由基抑制剂，其分子式为C₂₂H₂₆O₆，其化学结构式为：

本发明保护山地虎耳草中新的二芳基壬烷类Ⅰ自由基抑制剂的分离制备工艺，具体包括如下步骤：

步骤1，提取：将山地虎耳草全草阴干，粗碎后按料液比1g：5～100mL的甲醇提取，在室温下提取2～4次，每次2～4h，过滤、合并滤液，即滤液A，该滤液A经减压干燥得山地虎耳草提取物，按聚酰胺的量：山地虎耳草提取物的量＝3:1拌样并减压干燥，即得山地虎耳草提取物拌样样品；

步骤2，在线自由基抑制剂组分筛选：在1g山地虎耳草拌样样品中加入体积浓度为70～90％的甲醇进行溶解，配制样品浓度为50.0～100.0mg/mL，经0.45μm微孔滤膜过滤，得到山地虎耳草甲醇样品溶液，即滤液B，取1mL滤液B，利用在线HPLC-DPPH色谱联用系统，筛选山地虎耳草粗样中自由基抑制剂组分，其中，所述在线HPLC-DPPH色谱联用系统，第一台高效液相色谱仪采用耐纯水C18(250×4.6mm，5μm)反相色谱柱，检测波长为210nm；第二台高效液相色谱仪进甲醇溶解的DPPH溶液，检测波长为517nm；