[发明专利]一种内切褐藻胶裂解酶、其编码基因及应用有效
| 申请号： | 202110203345.7 | 申请日： | 2021-02-23 |
| 公开（公告）号： | CN113046378B | 公开（公告）日： | 2022-08-05 |
| 发明（设计）人： | 邵宗泽;周梅先;陈琳 | 申请（专利权）人： | 自然资源部第三海洋研究所 |
| 主分类号： | C12N15/60 | 分类号： | C12N15/60;C12N9/88;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/12;C12R1/19 |
| 代理公司： | 厦门市首创君合专利事务所有限公司 35204 | 代理人： | 张松亭;游学明 |
| 地址： | 361000 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 褐藻 裂解 编码 基因 应用 | ||
1.一种表达内切褐藻胶裂解酶的基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO :1 所示。
2.一种表达内切褐藻胶裂解酶的基因，其特征在于，其由SEQ ID NO :1 所示的核苷酸序列去除其5’端57bp片段得到。
3.一种重组载体，其含有权利要求1或2所述的一种表达内切褐藻胶裂解酶的基因。
4.一种重组菌，其含有权利要求3所述的重组载体。
5.一种内切褐藻胶裂解酶，其特征在于：其氨基酸序列如SEQ ID NO:2 所示。
6.一种内切褐藻胶裂解酶，其特征在于：其由SEQ ID NO:2 所示的氨基酸序列去除其N端19个氨基酸得到。
7.如权利要求5或6所述的内切褐藻胶裂解酶的用途，其用于褐藻利用和/或褐藻寡糖生产。
8.一种内切褐藻胶裂解酶的制备方法，包括如下步骤：
（1）获取弧菌
（2）设计并合成扩增去除信号肽编码序列的内切褐藻胶裂解酶基因
上游引物VAL3F: 5’-GATCACATATGTGTACCTCTACTTCTGCT-3’
下游引物VAL3R: 5’-GATCACTCGAGGCCTTCGTACTTGCTATG-3’；
（3）PCR扩增及重组质粒的构建：采用步骤（2）的引物以步骤（1）的基因组DNA为模板进行扩增；PCR产物经限制性内切酶
（4）内切褐藻胶裂解酶的表达与纯化：将含有内切褐藻胶裂解酶基因的重组质粒转化入大肠杆菌
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