[发明专利]一种使番茄果实形状变长的方法

说明书

本发明涉及一种使番茄果实形状变长的方法，通过调控DWARF基因在番茄中超量表达，使番茄果实形状变长。与现有技术相比，本发明通过调控DWARF基因在番茄植株中的超量表达，增大番茄的纵径与横径的比值，使果实变长。

技术领域

本发明属于植物分子生物学领域，具体涉及一种使番茄果实形状变长的方法。

背景技术

番茄是世界栽培最广的果蔬之一。番茄果实形状与果实大小和外观品质等性状有重要的联系，而长果形番茄相较于圆果形番茄在机械化采收及后续的运输方面有着先天的优势，同时长果形番茄能够满足不同消费者的需求。

油菜素内酯(Brassinolide,BL)也叫芸苔素内酯，是一类具有高生理活性的天然甾醇类植物激素，是目前发现生物活性最高的油菜素甾醇(Brassinosteroids,BRs)。BR广泛存在于植物的花粉、种子、茎和叶等器官中，除现有的5种激素(生长素、脱落酸、赤霉素、细胞分裂素、乙烯)外，已被国际誉为第六大类植物激素。油菜素内酯在植物的生长发育以及多种抗逆过程中具有非常广泛的作用，对种子细胞的膨大和植株、果实的形态等方面影响显著。

如李小晶在细胞分裂素等激素对番茄生殖器官生长及光系统Ⅱ光能吸收利用的影响报道了使用BR进行外源喷施番茄，促进果实膨大，但是此方法使果实的横径及纵径膨大后的结果并未造成形状的实质改变。甘肃富在番茄BRs受体基因SLBRI1果实特异表达载体构建及遗传转化番茄的研究中报道了构建了SLBRI1的超量载体，使得番茄果实纵横径同时变大，同样的，番茄的整体膨大，而并未造成果实形状的整体改变。

现有通过BR的调控方法控制番茄果实形态的方法只是造成番茄果实横纵径的同时增大，并未明显加大两者之间的差异，使番茄果实形态形成长形态。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供一种使番茄果实形状变长的方法。

具体技术方案如下：

一种使番茄果实形状变长的方法，其不同之处在于，调控DWARF基因在番茄中超量表达，使番茄果实形状变长，所述DWARF基因的序列如SEQ.NO.1所示。

与现有技术相比，本发明通过调控DWARF基因在番茄植株中的超量表达，增大番茄的纵径与横径的比值，使果实变长。

进一步，包括以下步骤：

步骤S1:构建DWARF基因的超量表达载体；

步骤S2:将所述超量表达载体转入农杆菌后浸染番茄外植体；

步骤S3:对所述步骤S2中的浸染过的番茄外植体筛选后长出愈伤组织，经进一步培育得到果实变长的番茄种质。

进一步，所述步骤S3中，待所述愈伤组织生长成幼苗后，将其植物组织进行DWARF基因表达量检测，以序列号为Solyc11g005330基因为内参基因，筛选出DWARF基因表达量提高了50～200倍的植株，经进一步培育得到变长的番茄果实。

采取上述进一步技术方案的技术效果在于：DWARF基因相对表达量增加50～200倍的植株可以加大果实的纵横径比值。

进一步，筛选出DWARF基因表达量提高了70～90倍的植株。

采取上述进一步技术方案的有益效果在于：DWARF基因相对表达量在70～90时，其纵横比进一步增大，在视觉上其果实有更明显的拉长效果。

进一步，所述步骤S3中，DWARF基因相对表达量测试方法包括：将番茄幼苗的组织经处理后提取其总RNA，经反转录得到其cDNA，通过检测引物检测其表达量，所述检测引物的上游序列如SEQ.NO.8所示，所述检测引物的下游序列如SEQ.NO.9所示。

进一步，所述步骤S1中，所述DWARF基因的超量表达载体包括含所述DWARF基因的目的片段。