[发明专利]一种使番茄果实形状变长的方法有效
申请号: | 202110195608.4 | 申请日: | 2021-02-19 |
公开(公告)号: | CN112877338B | 公开(公告)日: | 2022-06-10 |
发明(设计)人: | 张俊红;艾国;叶志彪;张余洋;王家发;李国斌;张得迪 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C12N15/84;C12N5/10;A01H4/00;A01H5/08;A01H6/82 |
代理公司: | 武汉蓝宝石专利代理事务所(特殊普通合伙) 42242 | 代理人: | 刘璐 |
地址: | 430000 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 番茄 果实 形状 变长 方法 | ||
1.一种使番茄果实形状变长的方法,其特征在于,调控DWARF基因在番茄中超量表达,使番茄果实形状变长,所述DWARF基因的ORF序列如SEQ ID NO.1所示。
2.根据权利要求1所述的使番茄果实形状变长的方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤S1:构建DWARF基因的超量表达载体;
步骤S2:将所述超量表达载体转入农杆菌后浸染番茄外植体;
步骤S3:对所述步骤S2中浸染过的番茄外植体筛选后长出愈伤组织,经进一步培育得到果实变长的番茄种质。
3.根据权利要求2所述的使番茄果实形状变长的方法,其特征在于,所述步骤S1中,所述DWARF基因的超量表达载体包括含所述DWARF基因ORF序列的目的片段。
4.根据权利要求2或3所述的使番茄果实形状变长的方法,其特征在于,所述步骤S3中,待所述愈伤组织生长成幼苗后,对其植物组织进行DWARF基因表达量检测,以序列号为Solyc11g005330的基因为内参基因,筛选出DWARF基因表达量提高了50~200倍的植株。
5.根据权利要求2或3所述的使番茄果实形状变长的方法,其特征在于,所述DWARF基因的超量表达载体骨架载体为pHellsgate8载体。
6.根据权利要求5所述的使番茄果实形状变长的方法,其特征在于,所述DWARF基因的超量表达载体构建方法包括:
步骤A1:以番茄组织的总RNA反转录而成的cDNA为模板,采用扩增引物扩增DWARF基因的ORF区域,获得目的基因片段;
步骤A2:将所述目的基因片段连接至线性化的pHellsgate8骨架载体上,转化后得到所述的DWARF基因的超量表达载体。
7.根据权利要求6所述的使番茄果实形状变长的方法,其特征在于,所述扩增引物的上游引物序列如SEQ ID NO.2所示,下游引物序列如SEQ ID NO.3所示。
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