[发明专利]一种慢病毒滴度检测引物、试剂盒及检测方法在审
| 申请号： | 202110118368.8 | 申请日： | 2021-01-28 |
| 公开（公告）号： | CN113151587A | 公开（公告）日： | 2021-07-23 |
| 发明（设计）人： | 施金秀;罗燕;蔡育宜 | 申请（专利权）人： | 云舟生物科技（广州）有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人： | 胡辉 |
| 地址： | 510663 广东省广州市高新技术产业开发区科*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 病毒 检测 引物 试剂盒 方法 | ||
1.一种引物，包含上游引物和下游引物，其特征在于，所述上游引物在SIN载体的3’LTR中的U3区设计，所述下游引物在SIN载体的5’LTR下游的慢病毒骨架设计。
2.根据权利要求1所述的引物，其特征在于，所述引物用于扩增序列如SEQ ID NO.1所示的片段、或包括序列与SEQ ID NO.1所示序列互补的序列片段、或包括序列与SEQ IDNO.1所示序列或其互补序列至少一个碱基插入、缺失或替换的序列。
3.根据权利要求1所述的引物，其特征在于，所述引物的序列为：
上游引物U3-F：AGGGCTAATTCACTCCCAACG(SEQ ID NO.2)；
下游引物LV-R：CGCTTTCAAGTCCCTGTTCG(SEQ ID NO.3)。
4.权利要求1～3任一项所述引物在慢病毒滴度检测中的应用。
5.一种试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含权利要求1～3任一项所述的引物。
6.根据权利要求5所述试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包含内参引物。
7.根据权利要求6所述试剂盒，其特征在于，所述内参引物的序列为：
BMP2-F：TAGGGTAGACAGAGCCAAGG(SEQ ID NO.4)；
BMP2-R：AGCACAGGACAAGAAAGTCATTG(SEQ ID NO.5)。
8.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包含待测样品的标准品。
9.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包含内参片段的标准品。
10.一种慢病毒滴度检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1：细胞计数并将慢病毒转导至细胞；
S2：提取细胞DNA；
S3：用权利要求1～3任一项所述引物或权利要求5～9任一项所述试剂盒进行qPCR扩增，进而分析得到病毒滴度。
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