[发明专利]一种促凝血桃花有效成分及其提取分离方法和应用

说明书

本发明公开了一种促凝血桃花有效成分的提取分离方法，包括以下步骤：将桃花用石油醚浸提，过滤，回收滤渣，然后用乙醇室温浸提，过滤、浓缩，得乙醇总浸膏；将乙醇总浸膏分散于少量水中形成分散液，依次用溶剂石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，回收溶剂，得到石油醚部位、乙酸乙酯部位及正丁醇部位；将正丁醇部位采用200~300目硅胶柱色谱分离，以二氯甲烷‑甲醇进行梯度洗脱，得到8个组分，按照所得组分极性由小到大依次标记为组分1~8。将组分4和组分7反复经硅胶H柱色谱分离，然后经Sephadex LH‑20凝胶柱色谱纯化。本发明采用特殊的方法从桃花中正丁醇部位分离得到了桃花有效成分，并对其体外促凝血效果考察，结果表明，具有良好的促凝血效果。

技术领域

本发明属于植物提取技术领域，具体涉及一种促凝血桃花有效成分及其提取分离方法和应用。

背景技术

桃花为蔷薇科（Rosaceae）桃属（Amygdalus）植物桃（Amygdalus persica L.）或山桃（Amygdalus davidiana）的花，味苦，性平，归心、肝、大肠经，有利水通便、活血化瘀之功效。目前，对桃花的化学研究多侧重于多酚的提取纯化工艺和脂溶性成分分析，研究结果表明，桃花（Amygdalus persica）挥发油中鉴定出苯甲醛、α-金合欢烯、十六烷酸等88种挥发性成分，且发现桃花挥发油对伤寒沙门氏菌等8种致病菌具有较强的抑制作用。然而，桃（Amygdalus persica L.）花的化学成分和药理作用仍然不确定，没有明确的理论证据。

血液凝固简称凝血，是在内源性或（和）外源性凝血途径下产生凝血酶原激活物，凝血酶原激活物在凝血因子的作用下产生凝血酶，最后凝血酶使纤维蛋白原转变为纤维蛋白，血液由溶胶状态转变为凝胶状态。凝血过程通常分为：①内源性凝血途径；②外源性凝血途径；③共同凝血途径。外源性凝血途径是从组织因子暴露于血液而启动，到因子X被激活的过程；临床上以凝血酶原时间(PT)测定来反映外源性凝血途径的状况。内源性凝血途径是指从因子XII激活，到因子X激活的过程；临床上以活化部分凝血活酶时间（APTT）来反映体内内源性凝血途径的状况。从因子X被激活至纤维蛋白形成，是内、外源共同凝血途径；主要包括凝血酶生成和纤维蛋白形成两个阶段。

机体凝血系统包括凝血和抗凝两个方面，两者间的动态平衡是正常机体维持体内血液流动状态和防止血液丢失的关键。促凝血药主要通过增强体内凝血因素或抑制抗凝血因素，促使凝血，以达到凝血目的，用于治疗各种出血疾病以及创伤性出血等。

发明内容

基于现有技术的不足，本发明目的在于提供一种促凝血桃花有效成分，并提供该促凝血桃花有效成分的提取分离方法和应用。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种促凝血桃花有效成分的提取分离方法，其包括以下步骤：

1）以干燥、粉粹后的桃花为原料，用石油醚浸提脱脂，石油醚浸提结束后过滤，回收滤渣，然后用乙醇室温浸提，乙醇浸提结束后，过滤、浓缩，得乙醇总浸膏；将乙醇总浸膏分散于少量水中形成分散液，依次用溶剂石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，回收溶剂，得到石油醚部位、乙酸乙酯部位及正丁醇部位；

2）将步骤1）所得正丁醇部位采用200~300目硅胶柱色谱分离，用二氯甲烷-甲醇进行梯度洗脱，以硅胶薄层色谱检测合并，得到8个组分，按照所得组分极性由小到大依次标记为组分1~8；

3）将步骤2）所得组分4，经硅胶柱色谱分离，以二氯甲烷-甲醇进行梯度洗脱，经硅胶薄层色谱检测，合并相同组分并减压回收溶剂，得到3个亚组分，按照所得组分极性由小到大依次标记为Fr.4.1、Fr.4.2、Fr.4.3；Fr.4.3先经硅胶柱色谱分离，然后用SephadexLH-20凝胶柱色谱纯化，薄层色谱检测、合并相同组分并减压浓缩回收溶剂、干燥，得到化合物1；