[发明专利]荧光定量PCR试剂盒、反应系统及核酸定量检测方法

权利要求书

1.一种荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，包括引物，以及两条以上的荧光探针，其中所述两条以上的荧光探针均具有与PCR模板互补的结合位点，所述PCR模板为单链DNA，且所述两条以上的荧光探针均互补结合于同一条核苷酸链。

2.根据权利要求1所述的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，所述单链DNA为双链DNA经转化得到的两条不互补的核苷酸链，所述引物包括第一引物对和第二引物对，所述第一引物对和第二引物对能够分别扩增所述两条不互补的核苷酸链生成互补链。

3.根据权利要求2所述的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，所述两条以上的荧光探针互补结合于所述单链DNA或其互补链中的同一条核苷酸链。

4.根据权利要求3所述的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，所述两条不互补的核苷酸链分别包括如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列，以及如SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列；

所述第一引物对如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示，所述第二引物对如SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10所示；

所述荧光探针包括如SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8、SEQ IDNO.11、和SEQ ID NO.12所示的探针，其中，所述SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示的荧光探针可以互补结合于SEQ IDNO.2所示的核苷酸序列或其互补链，所述SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.12所示的荧光探针可以互补结合于SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列或其互补链。

5.权利要求1-4任一项所述的荧光定量PCR试剂盒在制备基因检测试剂中的应用。

6.根据权利要求5所述的荧光定量PCR试剂盒在制备基因检测试剂中的应用，其特征在于，所述基因检测试剂为SDC2基因甲基化检测试剂。

7.一种荧光定量PCR系统，其特征在于，包括：

模板、引物及两条以上的荧光探针，其中，所述模板为单链DNA，所述两条以上的荧光探针均具有与所述模板互补的结合位点，且均互补结合于同一条核苷酸链。

8.根据权利要求7所述的荧光定量PCR系统，其特征在于，所述模板含两条互补或反向互补核苷酸链的单链DNA，所述两条以上的荧光探针可以互补结合于所述模板中的同一条或不同的核苷酸链。

9.一种非诊断目的的核酸定量检测方法，其特征在于，是采用权利要求1至4任一项中所述的荧光定量PCR试剂盒进行荧光定量PCR检测，或者是采用如权利要求7或8所述的一种荧光定量PCR系统。