[发明专利]来自细菌嗜肺巴斯德杆菌的CAS9蛋白的用途在审
申请号: | 202080092630.X | 申请日: | 2020-07-02 |
公开(公告)号: | CN115397995A | 公开(公告)日: | 2022-11-25 |
发明(设计)人: | K·V·谢韦里诺夫;S·A·什马科夫;D·N·阿尔塔莫诺娃;I·I·戈里亚宁;O·S·穆沙罗娃;J·V·安德烈耶娃;T·I·祖布克;I·V·费多罗娃;M·A·霍多尔科夫斯基;G·E·波贝加洛夫;A·N·阿尔谢涅夫;P·A·瑟尔科娃;A·A·瓦西里耶娃;T·O·阿尔塔莫诺娃;M·V·阿布拉莫娃 | 申请(专利权)人: | 拜奥卡德联合股份公司 |
主分类号: | C12N15/63 | 分类号: | C12N15/63;C12Q1/6806;C12N9/10;C12N15/75 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 黄登高;李唐 |
地址: | 俄罗斯联*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 来自 细菌 嗜肺巴斯德 杆菌 cas9 蛋白 用途 | ||
1. 蛋白质在DNA分子中形成定位紧接所述DNA分子中的核苷酸序列5’-NNNN(A/G)TT-3’之前的双链断裂的用途,所述蛋白质包含SEQ ID NO: 1的氨基酸序列,或包含与SEQ IDNO: 1的氨基酸序列具有至少95%同一性且与SEQ ID NO: 1的不同之处仅在于非保守氨基酸残基的氨基酸序列。
2.根据权利要求1所述的用途,其特征在于所述DNA分子中的双链断裂在35℃至45℃的温度下形成。
3. 根据权利要求1所述的蛋白质的用途,其中所述蛋白质包含SEQ ID NO: 1的氨基酸序列。
4.根据权利要求1所述的用途,其特征在于所述DNA分子中的双链断裂在哺乳动物细胞的基因组DNA中形成。
5.根据权利要求4所述的用途,其特征在于所述DNA分子中的双链断裂导致所述哺乳动物细胞的基因组DNA的修饰。
6. 一种用于修饰包含基因组DNA的单细胞或多细胞生物体的细胞中的基因组DNA序列的方法,所述方法包括将有效量的以下引入生物体的所述细胞内:a)包含SEQ ID NO: 1的氨基酸序列的蛋白质、或编码包含SEQ ID NO: 1的氨基酸序列的蛋白质的核酸,和b)包含与生物体的基因组DNA区域的核苷酸序列形成双链体的序列的引导RNA或编码所述引导RNA的DNA序列,所述核苷酸序列与核苷酸序列5’-NNNN(A/G)TT-3’直接相邻,并且在双链体形成之后与所述蛋白质相互作用;
其中所述蛋白质与引导RNA和核苷酸序列5’-NNNN(A/G)TT-3’的相互作用导致在紧邻序列5’-NNNN(A/G)TT-3’的基因组DNA序列中的双链断裂形成。
7.根据权利要求6所述的方法,其进一步包括与所述引导RNA同时引入外源DNA序列。
8.根据权利要求6所述的方法,其特征在于所述细胞是哺乳动物细胞。
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