[发明专利]一种适用于微量样本的DNA样本制备方法有效
申请号: | 202011642164.6 | 申请日: | 2020-12-31 |
公开(公告)号: | CN114686564B | 公开(公告)日: | 2023-10-24 |
发明(设计)人: | 顾颖;刘光宇;夏科科;杨勇 | 申请(专利权)人: | 深圳华大生命科学研究院 |
主分类号: | C12Q1/6806 | 分类号: | C12Q1/6806 |
代理公司: | 北京汇知杰知识产权代理有限公司 11587 | 代理人: | 杨巍;柴春玲 |
地址: | 518083 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 适用于 微量 样本 dna 制备 方法 | ||
1.一种适用于微量样本的DNA样本制备方法,所述方法包括:
1)将微量样本以液氮处理;
2)将所述液氮处理后的样本升温后温育;
3)将温育后的样本用水杨酸锂进行处理或者用磁珠进行纯化,获得所述微量样本的DNA样本。
2.根据权利要求1所述的方法,在3)中,在所述反应体系中水杨酸锂的浓度为1-4mM;
任选地,所述水杨酸锂处理的时间为5-15分钟。
3.根据权利要求1或2所述的方法,所述微量样本为微量植物样本或藻类样本。
4.根据权利要求3所述的方法,在1)中,所述微量植物样本在以液氮处理之前用表面活性剂进行处理;
任选地,所述表面活性剂为SDS或Triton X-100。
5.根据权利要求3所述的方法,在1)中,所述微量植物样本在表面活性剂处理时研磨碎。
6.根据权利要求1-5任一项所述的方法,在1)中,所述微量样本的量少于100mg或105个细胞;
优选地,所述微量样本的量为少于10mg或2×104个细胞;
更优选地,为1-5mg或(0.8-1.5)×104个细胞。
7.根据权利要求1-6任一项所述的方法,在2)中,所述温育的温度为50-70℃。
8.根据权利要求1-7任一项所述的方法,在2)中,所述温育的时间为5-10分钟。
9.根据权利要求1-8任一项所述的方法,在3)中,所述磁珠为AmPure XP Beads磁珠。
10.根据权利要求1-9任一项所述的方法,在3)中,磁珠纯化的步骤如下:将温育后的样本和磁珠轻轻吹打混匀数次,并在室温下孵育,然后置于磁力架上吸附,待液体澄清后弃去上清液;将磁珠以80%乙醇洗涤1-2遍,然后加入水溶解,静置后磁力架吸附取上清液。
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