[发明专利]一种适用于微量样本的DNA样本制备方法有效

专利信息
申请号: 202011642164.6 申请日: 2020-12-31
公开(公告)号: CN114686564B 公开(公告)日: 2023-10-24
发明(设计)人: 顾颖;刘光宇;夏科科;杨勇 申请(专利权)人: 深圳华大生命科学研究院
主分类号: C12Q1/6806 分类号: C12Q1/6806
代理公司: 北京汇知杰知识产权代理有限公司 11587 代理人: 杨巍;柴春玲
地址: 518083 广东*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 适用于 微量 样本 dna 制备 方法
【权利要求书】:

1.一种适用于微量样本的DNA样本制备方法,所述方法包括:

1)将微量样本以液氮处理;

2)将所述液氮处理后的样本升温后温育;

3)将温育后的样本用水杨酸锂进行处理或者用磁珠进行纯化,获得所述微量样本的DNA样本。

2.根据权利要求1所述的方法,在3)中,在所述反应体系中水杨酸锂的浓度为1-4mM;

任选地,所述水杨酸锂处理的时间为5-15分钟。

3.根据权利要求1或2所述的方法,所述微量样本为微量植物样本或藻类样本。

4.根据权利要求3所述的方法,在1)中,所述微量植物样本在以液氮处理之前用表面活性剂进行处理;

任选地,所述表面活性剂为SDS或Triton X-100。

5.根据权利要求3所述的方法,在1)中,所述微量植物样本在表面活性剂处理时研磨碎。

6.根据权利要求1-5任一项所述的方法,在1)中,所述微量样本的量少于100mg或105个细胞;

优选地,所述微量样本的量为少于10mg或2×104个细胞;

更优选地,为1-5mg或(0.8-1.5)×104个细胞。

7.根据权利要求1-6任一项所述的方法,在2)中,所述温育的温度为50-70℃。

8.根据权利要求1-7任一项所述的方法,在2)中,所述温育的时间为5-10分钟。

9.根据权利要求1-8任一项所述的方法,在3)中,所述磁珠为AmPure XP Beads磁珠。

10.根据权利要求1-9任一项所述的方法,在3)中,磁珠纯化的步骤如下:将温育后的样本和磁珠轻轻吹打混匀数次,并在室温下孵育,然后置于磁力架上吸附,待液体澄清后弃去上清液;将磁珠以80%乙醇洗涤1-2遍,然后加入水溶解,静置后磁力架吸附取上清液。

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