[发明专利]一种提高细毛羊羊毛同质性的分子育种方法

说明书

本发明公开了一种提高细毛羊羊毛同质性的分子育种方法。本发明提供了一种鉴定绵羊的GTL2‑REs基因型的方法：(1)以供试绵羊的基因组DNA为模板，采用序列1所示引物F1和序列2所示引物R1组成的引物对进行PCR扩增；(2)将产物进行琼脂糖凝胶电泳，如果显示单一特征带、该绵羊为GTL2‑REs纯合基因型，如果显示两条特征带、该绵羊为GTL2‑REs杂合基因型。本发明还提供了繁育具有同质毛性状的绵羊的方法，包括如下步骤：将GTL2‑REs杂合基因型的母绵羊作为母本，将GTL2‑REs纯合基因型的公绵羊作为父本，获得后代。本发明的方法可用于细毛羊同质毛的培育过程中，为防止幼龄异质毛后代的产生提供了新的分子育种方法。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种提高细毛羊羊毛同质性的分子育种方法，具体来说涉及绵羊GTL2-Mirg一段重复序列的不同基因型在毛用细毛羊羊毛同质性选育中的应用，可用于绵羊育种。

背景技术

细毛羊育种中，羊毛纤维的同质性至关重要。细毛羊的毛囊以次级毛囊为主，也会有少量的初级毛囊，特别是在出生羔羊中，部分羔羊出现明显较多数量的初级毛囊。初级毛囊生出的毛发多为有髓毛，毛质变硬，毛直径变粗，严重影响羊毛的品质。同质毛是毛纺工业对羊毛原料要求的前提，在细毛羊育种中要求被毛首先达到同质，在这个基础上再进一步要求羊毛综合品质的提高。近年来，由于羊毛与羊肉比价变化，肉价的提高促使羊毛的选择强度降低，更严重的是，在细毛羊产区逐渐出现的“倒改”趋势，也就是用本地粗毛公羊与细毛羊杂交，直接影响了后代的羊毛同质性。“倒改”导致优良性状的保持愈加困难，使得本就不能满足国内羊毛精加工的需求的优质细羊毛产量进一步降低，最终导致国内毛纺企业对于高品质羊毛的需求严重依赖进口。

在细毛羊的实际育种过程中，为了提高同质毛羊的比例，人们往往采取淘汰异质毛绵羊个体的选种方法，但实际上这种剔除方式不能达到完全的净化效果，事实上，在美利奴细毛羊品种中也始终没有完全剔除出生羔羊的异质毛型现象。到目前为止，尚未见到定位决定羊毛同质性或异质性的主效基因。因此，也未见利用基因进行该方向选育的方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种提高细毛羊羊毛同质性的分子育种方法，具体来说涉及绵羊GTL2-Mirg一段重复序列的不同基因型在毛用细毛羊羊毛同质性选育中的应用，可用于绵羊育种。

本发明提供了一种鉴定绵羊的GTL2-REs基因型的方法，包括如下步骤：

(1)以供试绵羊的基因组DNA为模板，采用引物F1和引物R1组成的引物对进行PCR扩增；引物F1为序列表的序列1所示的单链DNA分子，引物R1为序列表的序列2所示的单链DNA分子；

(2)将步骤(1)得到的产物进行琼脂糖凝胶电泳，如果显示单一特征带、该绵羊为GTL2-REs纯合基因型，如果显示两条特征带、该绵羊为GTL2-REs杂合基因型。

PCR扩增的反应体系中，引物F1的浓度为0.25mM，引物R1的浓度为0.25mM。PCR扩增的反应体系具体可为：引物F1 0.5μl，引物R1 0.5μl，2×taq PCR Mix 10μl，基因组DNA100ng，双蒸水补足20μl。

PCR扩增的反应程序具体可为：95℃5分钟；95℃30秒、55℃30秒、72℃30秒，35个循环；72℃5min；4℃保存。

所述琼脂糖凝胶电泳具体可为1.5％琼脂糖凝胶电泳。

所述PCR扩增的产物大小为400-600bp。

所述PCR扩增的目标产物大小为400-600bp。

所述PCR扩增的特异性目标产物大小为400-600bp。

相应的，所述特征带位于400-600bp区间内。

本发明还提供了一种繁育具有同质毛性状的绵羊的方法，包括如下步骤：