[发明专利]一种从蛋黄粉中提取高纯度溶血磷脂酰胆碱的方法

说明书

本发明涉及天然药物提取分离领域，公开了一种从蛋黄粉中提取高纯度溶血磷脂酰胆碱的方法，包括如下步骤：A、脱油蛋黄粉进行醇提取，过滤滤渣，合并滤液，浓缩干燥得到脱油蛋黄粉醇提物；B、将所述脱油蛋黄粉醇提物完全溶解，经过氧化铝柱层析分离，收集分离所得滤液，经过浓缩、干燥，获得脱油蛋黄粉提取物；C、将所述脱油蛋黄粉提取物完全溶解，装有反向填料的层析柱，采用短链醇的水溶液a作为洗脱剂，进行洗脱，合并洗脱液，浓缩干燥得到溶血磷脂酰胆碱粗品；D、将所述溶血磷脂酰胆碱粗品完全溶解，进行二次柱层析，采用烷烃‑短链醇体系进行洗脱，收集洗脱液，浓缩冻干，得到溶血磷脂酰胆碱产品。

技术领域

本发明涉及天然药物提取分离领域，具体涉及一种从蛋黄粉中提取高纯度溶血磷脂酰胆碱的方法。

背景技术

卵磷脂是最为常用的磷脂类化合物，因而溶血磷脂一般是指溶血卵磷脂，又称溶血磷脂酰胆碱(lysophosphatidylcholine，LPC)，是磷脂酰胆碱(PC)在磷脂酶A作用下，1位或2位酯键水解或酶解产生的降解产物，在原料制备、纯化及储藏等过程中，部分卵磷脂会分解产生溶血磷脂酰胆碱。LPC具有较强表面活性，因此能使红细胞及其他细胞膜破裂，引起溶血或细胞坏死。LPC导致溶血后，使毛细血管通透性增加而引起出血，使组织释放组织胺、5-羟色胺、肾上腺素、缓动素等，间接影响心血管及神经系统的功能，激发一系列复杂的病理反应。因此，LPC含量是药品，尤其是含有磷脂类辅料的注射剂重要的质量控制指标，直接关联药品的临床用药安全，需对其含量进行严格控制。

溶血磷脂酰胆碱主要是原辅料，制剂工艺，产品储存等过程由磷脂水解而产生的，由于其在天然中含量非常底，因此目前用于质控的溶血磷脂酰胆碱大多是直接采用磷脂进行水解，酶解，或采用甘油和脂肪酸进行合成而得到的，这改变了溶血磷脂酰胆碱的天然性质。由于溶血磷脂酰胆碱是磷脂1位或2位的酯键水解而得的降解产物，其具有一定的随机性，也就是说溶血磷脂是1位和2位的混合物，而经过人工水解，酶解，或合成手段不能完全保证其天然属性，这在进行质量控制过程中存在很大隐患。从中检院或国外购买溶血磷脂酰胆碱标准品时，大多都是经过人工水解，酶解或合成的，而天然来源的溶血磷脂酰胆碱由于其含量较低，导致其对照品价格十分昂贵，这大大增加了企业产品的检测成本。

因此，一种成本低廉，质量稳定的天然来源溶血磷脂酰胆碱是目前国内各大制剂企业所急需的，而目前尚未有一种成本低廉，质量稳定的天然来源的溶血磷脂酰胆碱制备工艺被报道。经检索，广州白云山汉方现代药业有限公司于2014申请了一篇一种天然来源溶血磷脂酰胆碱的制备方法，其以蛋黄或大豆磷脂作为其实原料，采用卤代烷烃-低碳醇-水作为洗脱剂，进行两次洗脱，最终得到含量98％～99.9％的溶血磷脂酰胆碱。上述技术方案可以获得天然来源的，质量可靠的溶血磷脂酰胆碱，但是其制备工艺中用到了大量的洗脱剂，包括毒性较大的卤代烷烃。同时该技术方案采用大豆或蛋黄磷脂作为起始物料，加之大豆或蛋黄磷脂成本较高，而且其中溶血磷脂酰胆碱含量较低，导致LPC提取成本较高。

发明内容

本发明的目的在于，解决现有技术中高纯度溶血磷脂酰胆碱的提取成本较高，洗脱效率低，提取溶剂高毒等技术问题，提供一种成本更加低廉，质量更加稳定的天然来源的溶血磷脂酰胆碱，从蛋黄粉作为起始物料，经过脱油，提取，柱层析分离等最终获得纯度高达98％以上的溶血磷脂酰胆碱，于此同时，还可以获得PC含量70％以上的蛋黄卵磷脂，通过一条工艺，可以实现两个品种的生产，大大降低了LPC的生产成本。

为了解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：

一种从蛋黄粉中提取高纯度溶血磷脂酰胆碱的方法，，包括如下步骤：

A、脱油蛋黄粉进行醇提取，过滤滤渣，合并滤液，浓缩干燥得到脱油蛋黄粉醇提物；

B、将所述脱油蛋黄粉醇提物完全溶解，经过氧化铝柱层析分离，收集分离所得滤液，经过浓缩、干燥，获得脱油蛋黄粉提取物；