[发明专利]一种从蛋黄粉中提取高纯度溶血磷脂酰胆碱的方法

权利要求书

1.一种从蛋黄粉中提取高纯度溶血磷脂酰胆碱的方法，其特征在于，包括如下步骤：

A、脱油蛋黄粉进行醇提取，过滤滤渣，合并滤液，浓缩干燥得到脱油蛋黄粉醇提物；

B、将所述脱油蛋黄粉醇提物完全溶解，经过氧化铝柱层析分离，收集分离所得滤液，经过浓缩、干燥，获得脱油蛋黄粉提取物；

C、将所述脱油蛋黄粉提取物完全溶解，采用短链醇的水溶液a作为洗脱剂，经过装有反向填料的层析柱进行洗脱，合并洗脱液，浓缩干燥得到溶血磷脂酰胆碱粗品；

D、将所述溶血磷脂酰胆碱粗品完全溶解，进行二次柱层析，采用烷烃-短链醇体系进行洗脱，收集洗脱液，浓缩冻干，得到溶血磷脂酰胆碱产品。

2.如权利要求1所述从蛋黄粉中提取高纯度溶血磷脂酰胆碱的方法，其特征在于，步骤D中，所述烷烃-短链醇体系包括：烷烃、短链醇按体积比1：1混合,所述烷烃包括氯仿、二氯甲烷中的一种或多种，所述短链醇包括甲醇、乙醇、异丙醇等中的一种或几种。

3.如权利要求1所述从蛋黄粉中提取高纯度溶血磷脂酰胆碱的方法，其特征在于，步骤D中，用氯仿将所述溶血磷脂酰胆碱粗品完全溶解，所述二次柱层析的填料包括硅胶，氧化铝中的一种或多种，所述溶血磷脂酰胆碱粗品与所述二次柱层析的填料按照质量比1：1～5填柱，径高比为1：1～1：10，过柱压力为0.3～1.0mPa，过柱温度20～40℃。

4.如权利要求1所述从蛋黄粉中提取高纯度溶血磷脂酰胆碱的方法，其特征在于，步骤C中，所述短链醇的水溶液a中，水的百分含量为5％～30％；所述短链醇包括甲醇，乙醇，正丁醇，异丙醇中的一种或多种。

5.如权利要求1所述从蛋黄粉中提取高纯度溶血磷脂酰胆碱的方法，其特征在于，步骤C中，用短链醇将所述脱油蛋黄粉提取物完全溶解，所述短链醇包括甲醇、乙醇、正丁醇、异丙醇中的一种或多种；所述反向填料包括C18键合的硅胶，C8键合的硅胶，C4键合的硅胶中一种或多种；所述脱油蛋黄粉提取物与所述反向填料按照质量比1：1～10填柱，径高比为1：1～1：10。

6.如权利要求1所述从蛋黄粉中提取高纯度溶血磷脂酰胆碱的方法，其特征在于，步骤C中，获得所述溶血磷脂酰胆碱粗品后，以所述短链醇的水溶液b为洗脱剂，对所述装有反向填料的层析柱进行二次洗脱，收集洗脱液，经过浓缩，活性炭进行脱色，过滤，浓缩，精制，冻干获得蛋黄卵磷脂产品；所述蛋黄卵磷脂产品中蛋黄卵磷脂含量大于70％；所述短链醇的水溶液b中，水的百分含量为0％～10％；所述短链醇包括甲醇、乙醇、正丁醇、异丙醇中的一种或多种。

7.如权利要求1所述从蛋黄粉中提取高纯度溶血磷脂酰胆碱的方法，其特征在于，步骤B中，用95％乙醇将所述脱油蛋黄粉醇提物完全溶解，所述脱油蛋黄粉醇提物按与氧化铝按照质量比1：1～5填料，径高比为1：1～1：10，以95％乙醇进行洗脱。

8.如权利要求1所述从蛋黄粉中提取高纯度溶血磷脂酰胆碱的方法，其特征在于，步骤A中，所述醇提取所用的醇包括甲醇、乙醇中的一种或多种及其水溶液；所述脱油蛋黄粉与醇的质量份数比为1：5～15，提取次数为2～6次，提取时间为1～8h，提取温度为15～50℃。

9.如权利要求1所述从蛋黄粉中提取高纯度溶血磷脂酰胆碱的方法，其特征在于，步骤A中，脱油蛋黄粉通过蛋黄粉脱油获得，所述脱油包括丙酮脱油法、超临界法中的一种；应用所述丙酮脱油法时，所述蛋黄粉与丙酮的质量比为1：1～10，脱油次数为1～5次，脱油温度为20～45℃，脱油后，合并丙酮不溶物，经过干燥得到所述脱油蛋黄粉；应用所述超临界法时，所述蛋黄粉置于萃取釜中，进行连续萃取，温度保持在25～45℃，CO₂流速控制在50～120kg/h，萃取釜压力为10～25Mpa，分离釜1压力为5～20Mpa，分离釜2压力为5～15Mpa，持续4～10h，得到所述脱油蛋黄粉。

10.一种如权利要求1所述从蛋黄粉中提取高纯度溶血磷脂酰胆碱的方法获得的溶血磷脂酰胆碱产品，其特征在于，所述溶血磷脂酰胆碱产品纯度高于98％。