[发明专利]一种高纯度番茄红素异构体的制备方法

说明书

本发明提供一种高纯度番茄红素异构体的制备方法，该制备方法以番茄红素顺反异构体混合物为原料，通过低温反相C18柱和C30柱的联合使用，可以实现七种番茄红素异构体的分离纯化。该方法简单易行，上样量大，所得七种番茄红素异构体的纯度均为97‑99%，可为番茄红素的异构化以及降解机理的研究提供基础。

技术领域

本发明涉及一种高纯度番茄红素异构体的制备方法。

背景技术

番茄红素，属于异戊二烯类化合物，是一种在天然番茄中含量较高的类胡萝卜素，是自然界种最强的抗氧化剂之一。它可以有效的防治因衰老及免疫力下降引起的各种疾病，因而长期以来受到了广泛关注。番茄红素的稳定性较差，除易氧化降解外，番茄红素对光照和温度都较为敏感。在自然番茄中，番茄红素几乎全以全反式的形式存在，但在提取及储藏过程中会出现降解和往顺式转化。由于番茄红素的双键较多，其顺式异构体的数目众多。由于结构高度相似，顺式番茄红素和反式番茄红素的分离较为困难，导致其纯度不高，是公认的技术难题之一。获得高纯度的顺式和反式番茄红素异构体单体，对研究其降解和转化非常重要，进而对番茄红素的产业化具有重要意义。

发明内容

本发明目的在于，提供一种高纯度番茄红素异构体的制备方法，该方法以番茄红素顺反异构体混合物为原料，通过低温反相C18柱和C30柱的联合使用，实现七种番茄红素异构体的分离纯化。该方法简单易行，上样量大，所得七种番茄红素异构体的纯度均为97-99％，可为番茄红素的异构化以及降解机理的研究提供基础。

本发明所述的一种高纯度番茄红素异构体的制备方法，其特征在于按下列步骤进行：

a、称取20mg番茄红素顺反异构体混合物原料，溶于乙酸乙酯含量范围为30％-70％的乙酸乙酯-乙腈混合溶液5mL中，使用有机滤头过滤，待用；

b、取一根反相C18制备色谱柱，规格为长度250mm，内径4.6mm，装填用填料粒径5μm，连接于高效液相色谱仪上，以乙酸乙酯含量为45％-55％的乙酸乙酯-乙腈混合液为流动相，柱温范围-20℃--40℃，流速控制在1.0mL/min，检测波长分别为472nm，平衡色谱柱15min，进样步骤a中的番茄红素样品，分别收集番茄红素顺式和反式异构体的峰，在温度-20℃冷阱下用氮气气流分别吹干，再分别溶于甲醇含量为35％的甲基叔丁基醚-甲醇混合物中，待用；

c、取一根C30制备色谱柱，规格为长度250mm，内径4.6mm，装填用填料粒径5μm，连接于高效液相色谱仪上，以甲醇含量为35％的甲基叔丁基醚-甲醇混合物为流动相，柱温控制在30℃，流速控制在1.0mL/min，检测波长分别为472nm，平衡色谱柱15min，取步骤b中所得样品，进样至平衡好的色谱柱中，分别收集各番茄红素的色谱峰，在温度-20℃冷阱下用氮气气流分别吹干，即得到番茄红素异构体，通过高效液相色谱法测定其纯度97-99％。

其中步骤a中乙酸乙酯-乙腈混合溶液中乙酸乙酯的含量为30％-70％。

步骤b中所述的乙酸乙酯-乙腈混合溶液中乙酸乙酯含量为45％-55％。

本发明所述的一种高纯度番茄红素异构体的制备方法，该制备方法以番茄红素顺反异构体混合物为原料，通过低温反相C18柱和C30柱的联合使用，可以实现七种番茄红素异构体的分离纯化。方法简单易行，上样量大，所得七种番茄红素异构体的纯度均97-99％，为茄红素的异构化以及降解机理的研究提供基础。

附图说明

图1为本发明低温反相C18色谱柱分离番茄红素样品图；

图2为本发明C30色谱柱分离番茄红素样品图，其中2a为15min-21min时间段所收集的组分，图2b为21min-30min时间段所收集的组分。

具体实施方式

下面结合具体实施例，进一步详细阐述本发明。

实施例1