[发明专利]一种检测非洲猪瘟病毒的引物探针组合及基于微流控芯片Digital PCR的检测方法在审
| 申请号： | 202011273737.2 | 申请日： | 2020-11-14 |
| 公开（公告）号： | CN112301167A | 公开（公告）日： | 2021-02-02 |
| 发明（设计）人： | 王爱萍;贾蕊;张改平;刘红亮;孙亚宁;邢广旭;王彦伟;蒋敏;田媛媛;白怡霖 | 申请（专利权）人： | 郑州大学;河南中泽生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11 |
| 代理公司： | 郑州联科专利事务所(普通合伙) 41104 | 代理人： | 杨海霞 |
| 地址： | 450001 河南*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 非洲 猪瘟 病毒 引物 探针 组合 基于 微流控 芯片 digital pcr 方法 | ||
1.一种检测非洲猪瘟病毒的引物探针组合，其特征在于：所述引物探针组合中引物对的核酸序列如SEQ ID NO.1~2所示，所述引物探针组合中探针的核酸序列如SEQ ID NO.3所示。
2.如权利要求1所述的引物探针组合，其特征在于：所述引物探针组合用于扩增非洲猪瘟病毒的B646L基因的保守序列，所述保守序列具体如SEQ ID NO.4所示。
3.如权利要求1所述的引物探针组合，其特征在于：所述探针的5′端修饰有发光的荧光基团，3′端修饰有荧光淬灭基团。
4.如权利要求3所述的引物探针组合，其特征在于：所述发光的荧光基团为FAM；所述荧光淬灭基团为MGB。
5.权利要求1所述引物探针组合在检测非洲猪瘟病毒中的应用。
6.利用权利要求1所述引物探针组合检测非洲猪瘟病毒的方法，其特征在于：利用上述引物探针组合进行荧光定量PCR或基于微流控芯片Digital PCR，所述引物对的添加浓度为12.5pmol/L~100 pmol/L；所述探针的添加浓度为1.25 pmol/L~10 pmol/L。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于：所述引物对的添加浓度为12.5 pmol/L；所述探针的添加浓度为10 pmol/L。
8.如权利要求6所述的方法，其特征在于：利用上述引物探针组合进行基于微流控芯片Digital PCR时，最低检测限为每微升模板30~35 copies。
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