[发明专利]组合物及其在病毒抑制剂或灭活剂中的应用

说明书

本发明涉及一种用于处理病毒或病毒感染细胞的组合物，所述组合物低温处理水痘‑带状疱疹病毒及其感染后的细胞，可以使病毒被灭活的同时，即使按照相关管理办法进行低温运输，依然能够不影响核糖体从mRNA上脱落或解离，从而可以从翻译组层面来开展药物或疫苗研发以及相关研究。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及用于处理病毒或病毒感染细胞的组合物及其在病毒或病毒感染细胞的灭活剂或抑制剂中的应用。

背景技术

水痘-带状疱疹病毒，属于人疱疹病毒属，病毒颗粒150～200nm，病毒糖蛋白E(gE)是宿主免疫系统识别的最主要糖蛋白，其初次感染引发水痘，随后病毒潜伏在神经节中，当机体免疫力下降时，再次激活引起带状疱疹。

目前已针对水痘-带状疱疹病毒的基因组完成测序并进行解析，其基因组约为125Kb的线性双链DNA，至少可编码71种蛋白质(Jeffrey I.Cohen,2010)。也有众多研究是从水痘-带状疱疹病毒感染不同细胞后开展的转录组层面的研究(Maria A Nagel.,2011；Soo-Jin Oh,et al.,2019)，为治疗该病毒引起的疾病药物或疫苗研发等奠定了扎实的研究基础。不过我们发现尚无研究是从水痘-带状疱疹病毒翻译组层面来开展研究的。

本发明在开展水痘-带状疱疹病毒翻译组层面的研究时，发现目前已有的高温灭活方式或者实验室内部已有的裂解方法等，使得该病毒感染细胞在实验室之间按照相关管理条例进行运输后，无法继续开展翻译层面的研究。因而需要找到一种可以稳定的抑制或灭活该病毒、同时不影响核糖体脱落，能够在低温环境下将从病毒或病毒感染细胞从BSL2实验室A运输到BSL2实验室B中，仍然能够继续开展下游翻译组研究。本发明也可为其他类似病毒开展翻译组层面的研究提供启示。

发明内容

本发明提供了一种病毒的灭活方法，可以稳定地抑制或灭活病毒活性，能够便于病毒及其感染后细胞在远距离的实验室之间基于相关管理办法进行低温运输后，不影响核糖体从mRNA上脱落或解离，进而能够使得从病毒翻译组层面来开展药物或疫苗研发以及相关研究成为可能。

为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为发明了一种用于处理病毒或病毒感染细胞的组合物。用这种组合物处理过的水痘-带状疱疹病毒及其感染后的细胞，可以稳定地抑制或灭活水痘-带状疱疹病毒活性，同时不会让核糖体从mRNA上脱落或解离，从而能够便于水痘-带状疱疹病毒及其感染后的细胞在远距离的实验室之间基于相关管理办法进行低温运输后，仍然能够满足下游翻译组及其相关实验开展的要求。

本发明的第一方面涉及一种用于处理病毒或病毒感染细胞的组合物，其组分如下：羟乙基哌秦乙硫磺酸、MgCl₂、KCl、乙基苯基聚乙二醇NP-40、蛋白酶抑制剂、放线菌酮和Triton X-100。

优选的，所述的组合物为包括如下溶液的混合液：

溶液A：含有羟乙基哌秦乙硫磺酸、MgCl₂、KCl的溶液，

溶液B：含有蛋白抑制剂的乙基苯基聚乙二醇NP-40溶液，

溶液C：含有放线菌酮的溶液，

溶液D：Triton X-100溶液。

优选的，所述的溶液A是由0.8～1.2M的羟乙基哌秦乙硫磺酸溶液、1.2～1.8M的MgCl₂溶液和1.5～2.5M的KCl溶液以1:0.8～1.2:0.8～1.2的比例混合而成；进一步优选的，所述的溶液A是由1.0M的羟乙基哌秦乙硫磺酸溶液、1.5M的MgCl2溶液和2.0M的KCl溶液以1:1:1的比例混合而成。

优选的，所述的溶液B是由1％NP-40和1×蛋白酶抑制剂以1000:0.8～1000:1.2的比例混匀制成的；进一步优选的，所述的溶液B是由1％NP-40和1×蛋白酶抑制剂以1000:1的比例混匀制成的。