[发明专利]一种用于扫描电子显微镜的细菌制样方法及试剂盒

权利要求书

1.一种将细菌固定于玻璃片的方法，其特征在于：包括如下步骤：

1)将壳聚糖溶液覆盖于玻璃片，自然干燥，使玻璃片表面覆盖一层壳聚糖膜；

2)将细菌悬液置于覆被壳聚糖膜的玻璃片表面，静置，使菌体吸附于壳聚糖膜。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤1)所述壳聚糖溶液浓度为0.1～3％(m/v)；优选地，为2.5％(m/v)。

3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于：步骤1)所述壳聚糖溶液以醋酸溶液为溶剂；

优选地，所述醋酸溶液浓度为0.5％～2％(v/v)；进一步优选地，醋酸溶液浓度为1％(v/v)；

进一步优选地，步骤2)所述静置持续5min以上；优选地，静置持续时间为30min。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述细菌为大肠杆菌或金黄色葡萄球菌。

5.一种用于扫描电子显微镜的细菌制样方法，其特征在于：所述制样方法包括如下步骤：

1)使用权利要求1～4任一所述方法将细菌悬液固定于细胞爬片；

2)加醛类溶液固定细菌，磷酸盐缓冲液洗涤；

3)加梯度浓度乙醇溶液使细菌脱水；

4)二氧化碳临界点干燥细菌；

5)对细菌表面镀金。

6.如权利要求5所述的制样方法，其特征在于：所述细菌为大肠杆菌或金黄色葡萄球菌。

7.如权利要求5所述的制样方法，其特征在于：所述步骤1)中细菌悬液的OD₆₀₀为0.2～0.8；优选地，为0.3～0.6；

优选地，所述步骤2)的醛类溶液为戊二醛、甲醛或多聚甲醛溶液。

8.一种用于扫描电子显微镜样本的细菌粘片剂，其特征在于：所述粘片剂为以0.5％～2％(v/v)的醋酸溶液为溶剂配制成的浓度为0.1～3％(m/v)的壳聚糖溶液。

9.如权利要求8所述的粘片剂，其特征在于：

所述醋酸溶液的醋酸含量为1％(v/v)；

和/或，所述壳聚糖溶液中壳聚糖浓度为0.1～3％(m/v)；优选地，为2.5％(m/v)。

10.一种用于扫描电子显微镜的细菌制样试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括权利要求8或9所述的粘片剂。