[发明专利]一种绿原酸人工抗原及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 202010956230.0 | 申请日： | 2020-09-11 |
| 公开（公告）号： | CN112028989B | 公开（公告）日： | 2022-12-02 |
| 发明（设计）人： | 张小莺;许龙;陈琛;刘祥 | 申请（专利权）人： | 陕西理工大学 |
| 主分类号： | C07K14/765 | 分类号： | C07K14/765;C07K14/77;C07K16/44;C07K16/02;G01N33/53;G01N33/68 |
| 代理公司： | 乌鲁木齐恒智专利商标代理事务所(普通合伙) 65102 | 代理人： | 李靖 |
| 地址： | 723000*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 绿原酸 人工 抗原 及其 制备 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种绿原酸人工抗原的制备方法，其特征在于包含如下步骤：
（1）称取载体蛋白和6-氨基己酸，加入2-(N-吗啉)乙磺酸（MES）溶液溶解，再加入碳化二亚胺盐酸盐（EDAC），室温条件下，持续搅拌反应12h；
（2）反应完成后，将反应液置于透析袋中，在4℃以PBS透析72h，获得氨基化的载体蛋白溶液；
(3)称取绿原酸，加DMF溶解，再加入NHS和EDAC，16℃搅拌过夜，制成绿原酸活化中间产物；
（4）在磁力搅拌器上边搅拌边将绿原酸活化中间产物逐滴加入到氨基化的载体蛋白溶液中，搅拌过夜；
（5）次日将搅拌过夜的反应液置于处理过的透析袋中，在4℃的0.01M的PBS中透析72h，每8h换透析液一次；
（6）透析结束后，将透析袋内液体离心，去沉淀，即得绿原酸人工抗原，其结构如下：
；
步骤（1）中，载体蛋白使用的牛血清白蛋白或卵清蛋白为30mg；6-氨基己酸为6mg；2-(N-吗啉)乙磺酸（MES）溶液8mL，EDAC为25mg；
步骤（3）中，绿原酸为10mg；DMF为0.5mL；NHS为15mg；EDAC为16mg；
PBS的pH为7.4。
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