[发明专利]一种丙环唑半抗原、完全抗原和其抗体及其制备和应用有效
| 申请号: | 202010925563.7 | 申请日: | 2020-09-04 |
| 公开(公告)号: | CN112225725B | 公开(公告)日: | 2021-09-14 |
| 发明(设计)人: | 沈兴;陈博;雷红涛;李向梅;陈佳虹;王锦;徐振林;杨金易;沈玉栋;孙远明 | 申请(专利权)人: | 华南农业大学 |
| 主分类号: | C07D405/06 | 分类号: | C07D405/06;C07K14/765;C07K14/795;C07K16/06;C07K16/44;G01N33/53;G01N33/543;G01N33/558;G01N33/58 |
| 代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 赵崇杨 |
| 地址: | 510642 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 丙环唑 半抗原 完全 抗原 抗体 及其 制备 应用 | ||
1.一种丙环唑半抗原,其特征在于,其结构式如式(I)所示:
2.权利要求1所述丙环唑半抗原的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:将丙环唑类似物溶解于无水二氯甲烷后,加入丁二酸酐和4-二甲氨基吡啶进行反应,薄层层析硅胶板确认产物;反应产物经旋干后,加入乙酸乙酯和饱和食盐水萃取,酯层用无水硫酸钠干燥,最后浓缩后即得到丙环唑半抗原;所述丙环唑类似物的结构式为:
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述薄层层析的展开剂为体积比为3:1的乙酸乙酯和石油醚。
4.一种丙环唑完全抗原,其特征在于,所述丙环唑完全抗原的结构式如下:
5.权利要求4所述丙环唑完全抗原的制备方法,其特征在于,是由权利要求1所述丙环唑半抗原经活泼酯法与载体蛋白偶联得到。
6.根据权利要求5所述丙环唑完全抗原的制备方法,其特征在于,所述载体蛋白为牛血清蛋白或钥孔血蓝蛋白。
7.一种丙环唑多克隆抗体的制备方法,其特征在于,是将权利要求4所述丙环唑完全抗原乳化后免疫新西兰大白兔得到。
8.一种检测丙环唑的酶联免疫试剂盒,其特征在于,包括有:包被有包被原的酶标板、丙环唑标准品溶液、丙环唑多克隆抗体、酶结合物浓缩液、酶结合物稀释液、底物显色液、终止液、洗涤液;
所述包被原为丙环唑半抗原与蛋白的偶联物;所述酶结合物为辣根过氧化物酶标记的丙环唑多克隆抗体;所述丙环唑多克隆抗体为权利要求7所述方法制备得到的丙环唑多克隆抗体。
9.一种丙环唑胶体金快速检测试纸条,其特征在于,包括有衬板(1)和依次排列在衬板(1)上的样品垫(2)、金标结合物垫(3)、纤维素膜(4)和吸水垫(7),所述金标结合物垫(3)内吸附有胶体金标记的权利要求7所述方法制备得到的丙环唑多克隆抗体,所述纤维素膜(4)上有隐形检测线(5)和隐形对照线(6),所述隐形检测线(5)采用权利要求4所述丙环唑完全抗原溶液印制,所述隐形对照线(6)采用羊抗兔抗体印制。
10.根据根据权利要求9所述试纸条,其特征在于,所述金标结合物垫(3)与所述样品垫(2)之间设置有保护膜(8-1),且该保护膜上印制有待测样品标识线(9),该标识线偏向样品垫(2)一侧0.5cm处。
11.根据权利要求9所述试纸条,其特征在于,所述样品垫(2)采用玻璃纤维棉和/或尼龙膜和/或聚偏二氟乙烯膜和/或聚酯膜中的制成,所述纤维素膜(4)采用硝酸纤维素膜和/或纯纤维素膜和/或羧化纤维素膜制成。
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