[发明专利]獐牙菜的提取物在制备抑制谷胱甘肽S-转移酶活性的药物中的应用

说明书

本发明涉及生化分析与药物筛选领域，公开了一种獐牙菜的提取物在制备抑制谷胱甘肽S‑转移酶活性的药物中的应用。所述獐牙菜的提取物选自：和中的至少一种。本发明还提供了含有上述獐牙菜的提取物的药物组合物。本发明提供的獐牙菜的提取物对细胞内谷胱甘肽S‑转移酶活性具有较强的抑制作用，联合抗肿瘤药物的使用，能够增强协同效应，显著提高肿瘤细胞的杀伤效率。

技术领域

本发明涉及生化分析与药物筛选领域，具体涉及一种獐牙菜的提取物在制备抑制谷胱甘肽S-转移酶活性的药物中的应用。

背景技术

谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase，GSTs)是谷胱甘肽结合反应的关键酶，催化谷胱甘肽结合反应的起始步骤。GSTs能够催化机体内有害极性化合物与谷胱甘肽的结合，还能够以非酶结合方式将体内各种潜在的致癌物和亲脂性化合物从体内排出，以达到解毒目的。研究表明，GSTs的酶活性水平与肿瘤的耐药性密切相关，可能是治疗耐药肿瘤的潜在药物作用靶点。

已有研究发现，在一些耐药性强的肿瘤细胞中能观测到过度表达的GSTs，因此，GSTs抑制剂的研究对抗肿瘤药物研发具有重要意义。近年来对GSTs抑制剂的研究越来越多，目前报道的GSTs抑制剂主要有依他尼酸及其类似物、TLK199及其类似物、黄酮类化合物、双功能基化合物，但这些GSTs抑制剂中多数需要经人工合成得到，存在制备工艺复杂、成本高等缺点。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术存在的问题，提供一种獐牙菜的提取物在制备抑制谷胱甘肽S-转移酶活性的药物中的应用。

为了实现上述目的，本发明第一方面提供一种獐牙菜的提取物在制备抑制谷胱甘肽S-转移酶活性的药物中的应用，所述獐牙菜的提取物选自：

中的至少一种。

优选地，所述獐牙菜的提取物的筛选方法，包括以下步骤：

(1)将獐牙菜经提取、分离、纯化处理后，得到待筛选提取物；

(2)在谷胱甘肽和谷胱甘肽S-转移酶存在的情况下，将所述待筛选提取物与探针进行混合I，筛选出不能恢复所述探针的荧光的化合物，得到所述獐牙菜的提取物；

其中，所述探针含有荧光基团和猝灭基团，所述谷胱甘肽S-转移酶能够催化所述谷胱甘肽与所述探针中的缺电子识别位点结合，从而恢复所述探针的荧光。

优选地，步骤(1)中所述提取的过程包括：将所述獐牙菜用有机溶剂I回流提取得到提取液，所述提取液经干燥得到总浸膏；

所述分离的过程包括：将所述总浸膏用水分散，依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇进行萃取，得到石油醚浸膏、二氯甲烷浸膏、乙酸乙酯浸膏和正丁醇浸膏，将所述石油醚浸膏经硅胶柱分离，并用石油醚-乙酸乙酯混合液梯度洗脱后得到石油醚流分，将所述乙酸乙酯浸膏经硅胶柱分离，并依次用石油醚-丙酮混合液和二氯甲烷-甲醇混合液分别进行梯度洗脱，得到乙酸乙酯流分；

所述纯化的过程包括：将所述石油醚流分和所述乙酸乙酯流分分别进行清洗或硅胶柱层析处理，得到所述待筛选提取物。

优选地，所述硅胶柱分离采用200-300目的硅胶。

优选地，步骤(2)中所述探针的所述荧光基团由试卤灵提供，所述猝灭基团由2，4-二硝基苯磺酰氯提供。

优选地，所述探针的制备方法包括以下步骤：在无氧条件下，在有机溶剂II中将荧光剂与三乙胺进行混合II后，再与猝灭剂进行混合III；其中，所述荧光剂为试卤灵，所述猝灭剂为2，4-二硝基苯磺酰氯。

优选地，所述有机溶剂II选自四氢呋喃、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺和二甲基亚砜中的至少一种；

所述混合II至少满足以下条件：温度为15-25℃、搅拌时间为25-35min；