[发明专利]獐牙菜的提取物在制备抑制谷胱甘肽S-转移酶活性的药物中的应用

权利要求书

1.獐牙菜的提取物在制备抑制谷胱甘肽S-转移酶活性的药物中的应用，其特征在于，所述抑制谷胱甘肽S-转移酶活性的药物用于增强抗肿瘤药物活性，所述抗肿瘤药物为顺铂，所述獐牙菜的提取物为：

。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述獐牙菜的提取物的筛选方法，包括以下步骤：

（1）将獐牙菜经提取、分离、纯化处理后，得到待筛选提取物；

（2）在谷胱甘肽和谷胱甘肽S-转移酶存在的情况下，将所述待筛选提取物与探针进行混合I，筛选出不能恢复所述探针的荧光的化合物，得到所述獐牙菜的提取物；

其中，所述探针含有荧光基团和猝灭基团，所述谷胱甘肽S-转移酶能够催化所述谷胱甘肽与所述探针中的缺电子识别位点结合，从而恢复所述探针的荧光。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，步骤（1）中所述提取的过程包括：将所述獐牙菜用有机溶剂I回流提取得到提取液，所述提取液经干燥得到总浸膏；

所述分离的过程包括：将所述总浸膏用水分散，依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇进行萃取，得到石油醚浸膏、二氯甲烷浸膏、乙酸乙酯浸膏和正丁醇浸膏，将所述石油醚浸膏经硅胶柱分离，并用石油醚-乙酸乙酯混合液梯度洗脱后得到石油醚流分，将所述乙酸乙酯浸膏经硅胶柱分离，并依次用石油醚-丙酮混合液和二氯甲烷-甲醇混合液分别进行梯度洗脱，得到乙酸乙酯流分；

所述纯化的过程包括：将所述石油醚流分和所述乙酸乙酯流分分别进行清洗或硅胶柱层析处理，得到所述待筛选提取物。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述硅胶柱分离采用200-300目的硅胶。

5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，步骤（2）中所述探针的所述荧光基团由试卤灵提供，所述猝灭基团由2，4-二硝基苯磺酰氯提供。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述探针的制备方法包括以下步骤：在无氧条件下，在有机溶剂II中将荧光剂与三乙胺进行混合II后，再与猝灭剂进行混合III；

其中，所述荧光剂为试卤灵，所述猝灭剂为2，4-二硝基苯磺酰氯。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述有机溶剂II选自四氢呋喃、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺和二甲基亚砜中的至少一种；

所述混合II至少满足以下条件：温度为15-25℃、搅拌时间为25-35min；

所述混合III至少满足以下条件：温度为15-25℃、搅拌时间为10-15h。

8.根据权利要求6或7所述的应用，其特征在于，所述探针的制备方法还包括：将所述混合III得到的混合液除去所述有机溶剂II后，经硅胶层析纯化得到所述探针。

9.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，步骤（2）中，以浓度为10mg/L的谷胱甘肽S-转移酶为基准，所述探针的浓度为3-8mg/L，所述谷胱甘肽的浓度为180-220μM，所述待筛选提取物的浓度为15-25μM；

所述混合I的过程包括：将所述待筛选提取物与所述谷胱甘肽S-转移酶进行混合I-1后，再与所述探针和所述谷胱甘肽进行混合I-2；

所述混合I-1至少满足以下条件：温度为0-40℃、时间为10-20min；

所述混合I-2至少满足以下条件：温度为35-40℃、时间为15-25min。