[发明专利]一种WH54聚合酶及其在RT-PCR中的应用在审
| 申请号： | 202010847462.2 | 申请日： | 2020-08-21 |
| 公开（公告）号： | CN114075558A | 公开（公告）日： | 2022-02-22 |
| 发明（设计）人： | 郑越;董宇亮;章文蔚 | 申请（专利权）人： | 深圳华大生命科学研究院 |
| 主分类号： | C12N9/12 | 分类号： | C12N9/12;C12N15/54;C12Q1/686 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 白艳 |
| 地址： | 518083 广东省深圳市*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 wh54 聚合 及其 rt pcr 中的 应用 | ||
1.蛋白质，为如下1)或2)或3)：
1)氨基酸序列是序列表中序列2所示的蛋白质；
2)在序列表中序列2所示的蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质；
3)将1)或2)所示的蛋白质经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到具有相同功能的蛋白质。
2.根据权利要求1所述的蛋白质，其特征在于：所述蛋白质具有逆转录酶和/或DNA聚合酶活性。
3.编码权利要求1或2所述蛋白质的核酸分子。
4.如权利要求3所述的核酸分子，其特征在于：所述核酸分子为如下(a1)或(a2)或(a3)或(a4)所示的DNA分子：
(a1)编码区包括序列表中序列1的DNA分子；
(a2)核苷酸序列是序列表中序列1的DNA分子；
(a3)与(a1)或(a2)限定的核苷酸序列具有75％或75％以上同一性，且编码权利要求1所述蛋白质的DNA分子；
(a4)在严格条件下与(a1)或(a2)限定的核苷酸序列杂交，且编码权利要求1所述蛋白质的DNA分子。
5.含有权利要求3或4所述核酸分子的表达盒、重组载体、重组微生物或转基因细胞系。
6.权利要求1或2所述蛋白质，或，权利要求3或4所述核酸分子，或，权利要求5所述表达盒、重组载体、重组微生物或转基因细胞系，在制备逆转录酶中的应用；
或，权利要求1或2所述蛋白质，或，权利要求3或4所述核酸分子，或，权利要求5所述表达盒、重组载体、重组微生物或转基因细胞系，在制备DNA聚合酶中的应用；
或权利要求1或2所述蛋白质，或，权利要求3或4所述核酸分子，或，权利要求5所述表达盒、重组载体、重组微生物或转基因细胞系，在制备具有逆转录和DNA聚合双重功能的酶中的应用。
7.权利要求1或2所述蛋白质在作为逆转录酶或DNA聚合酶或具有逆转录和DNA聚合双重功能的酶中的应用；
或，权利要求1或2所述蛋白质在逆转录反应或PCR反应或one-step RT-PCR中的应用；
或，含有权利要求1或2所述蛋白质的逆转录扩增体系或PCR扩增体系或one-step RT-PCR反应体系。
8.一种对待测核酸进行逆转录反应的方法，包括如下步骤：将权利要求1或2所述蛋白质作为逆转录酶对待测核酸进行逆转录反应。
9.一种对待测DNA进行PCR反应的方法，包括如下步骤：将权利要求1或2所述蛋白质作为逆转录酶对待测DNA进行PCR反应。
10.一种对待测RNA进行one-step RT-PCR反应的方法，包括如下步骤：用权利要求1或2所述蛋白质待测RNA进行one-step RT-PCR反应。
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