[发明专利]检测野生型腺相关病毒的通用引物及其应用在审

专利信息
申请号: 202010800663.7 申请日: 2020-08-11
公开(公告)号: CN114075610A 公开(公告)日: 2022-02-22
发明(设计)人: 林东;张玉蕊;刘兵;赵超 申请(专利权)人: 北京荷塘生华医疗科技有限公司
主分类号: C12Q1/70 分类号: C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93
代理公司: 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 代理人: 孙璐璐
地址: 102206 北京市昌平区医科路*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 检测 野生型 相关 病毒 通用 引物 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种检测野生型腺相关病毒的通用引物对/组合,其特征在于,包括第一引物和第二引物,所述第一引物的序列为5’-tggtgggaggagggVaagatgac-3’,其中简并碱基V为C、G或A;所述第二引物的序列为5’-cRcacatgttKgtRttgg-3’,其中简并碱基R为G或A,简并碱基K为G或T。

2.一种试剂盒,其特征在于,包含权利要求1所述的通用引物对/组合。

3.权利要求1所述的通用引物对/组合在制备试剂盒中的用途,所述试剂盒用于检测野生型腺相关病毒,其中,所述野生型腺相关病毒为12种血清型的野生型腺相关病毒,所述12种血清型的野生型腺相关病毒为AVV1~12。

4.权利要求1所述的通用引物对/组合或权利要求2所述的检测试剂盒在检测野生型腺相关病毒中的应用,其中,所述野生型腺相关病毒为12种血清型的野生型腺相关病毒,所述12种血清型的野生型腺相关病毒为AVV1~12。

5.权利要求1所述的通用引物对/组合在利用PCR或qPCR检测样品中野生型腺相关病毒的应用,其中,所述野生型腺相关病毒为12种血清型的野生型腺相关病毒,所述12种血清型的野生型腺相关病毒为AVV1~12。

6.一种利用权利要求1所述的通用引物对/组合的野生型腺相关病毒的qPCR检测方法,包括步骤:

1)提取待测样品中总DNA;

2)以总DNA为模板,利用所述通用引物进行qPCR扩增;

3)根据扩增结果,判定待测样品中是否存在野生型腺相关病毒,并对待测样品中野生型腺相关病毒的含量进行定量,

其中,所述野生型腺相关病毒为12种血清型的野生型腺相关病毒,所述12种血清型的野生型腺相关病毒为AVV1~12。

7.根据权利要求6所述的检测方法,其特征在于,进行qPCR扩增时的退火温度为50-60℃,优选53-57℃,进一步优选54-56℃。

8.根据权利要求6所述的检测方法,其特征在于,所述qPCR包括SYBR Green I qPCR和Taqman探针法qPCR的至少之一。

9.根据权利要求6所述的检测方法,其特征在于,所述待测样品为血液、细胞、组织样品或病毒样品。

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