[发明专利]检测野生型腺相关病毒的通用引物及其应用在审
| 申请号: | 202010800663.7 | 申请日: | 2020-08-11 |
| 公开(公告)号: | CN114075610A | 公开(公告)日: | 2022-02-22 |
| 发明(设计)人: | 林东;张玉蕊;刘兵;赵超 | 申请(专利权)人: | 北京荷塘生华医疗科技有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司: | 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 | 代理人: | 孙璐璐 |
| 地址: | 102206 北京市昌平区医科路*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 检测 野生型 相关 病毒 通用 引物 及其 应用 | ||
1.一种检测野生型腺相关病毒的通用引物对/组合,其特征在于,包括第一引物和第二引物,所述第一引物的序列为5’-tggtgggaggagggVaagatgac-3’,其中简并碱基V为C、G或A;所述第二引物的序列为5’-cRcacatgttKgtRttgg-3’,其中简并碱基R为G或A,简并碱基K为G或T。
2.一种试剂盒,其特征在于,包含权利要求1所述的通用引物对/组合。
3.权利要求1所述的通用引物对/组合在制备试剂盒中的用途,所述试剂盒用于检测野生型腺相关病毒,其中,所述野生型腺相关病毒为12种血清型的野生型腺相关病毒,所述12种血清型的野生型腺相关病毒为AVV1~12。
4.权利要求1所述的通用引物对/组合或权利要求2所述的检测试剂盒在检测野生型腺相关病毒中的应用,其中,所述野生型腺相关病毒为12种血清型的野生型腺相关病毒,所述12种血清型的野生型腺相关病毒为AVV1~12。
5.权利要求1所述的通用引物对/组合在利用PCR或qPCR检测样品中野生型腺相关病毒的应用,其中,所述野生型腺相关病毒为12种血清型的野生型腺相关病毒,所述12种血清型的野生型腺相关病毒为AVV1~12。
6.一种利用权利要求1所述的通用引物对/组合的野生型腺相关病毒的qPCR检测方法,包括步骤:
1)提取待测样品中总DNA;
2)以总DNA为模板,利用所述通用引物进行qPCR扩增;
3)根据扩增结果,判定待测样品中是否存在野生型腺相关病毒,并对待测样品中野生型腺相关病毒的含量进行定量,
其中,所述野生型腺相关病毒为12种血清型的野生型腺相关病毒,所述12种血清型的野生型腺相关病毒为AVV1~12。
7.根据权利要求6所述的检测方法,其特征在于,进行qPCR扩增时的退火温度为50-60℃,优选53-57℃,进一步优选54-56℃。
8.根据权利要求6所述的检测方法,其特征在于,所述qPCR包括SYBR Green I qPCR和Taqman探针法qPCR的至少之一。
9.根据权利要求6所述的检测方法,其特征在于,所述待测样品为血液、细胞、组织样品或病毒样品。
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